雞新城疫免疫膠體金診斷技術的研究.pdf

1、雞新城疫是雞的一種高度感染和致死性疾病,是由一種侵害呼吸道、胃腸道以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的新城疫病毒(NDV)所引起的.病毒存在于病雞的血液、腦、內臟、糞便和口鼻中,國內外對本病的控制仍沒有完全解決,雞新城疫對養(yǎng)雞業(yè)有著巨大的威脅.所以有必要建立一種快速、簡便、準確的膠體金免疫層析法(GICA)用于雞新城疫的診斷.膠體金技術最早是Faulk等于1971年報道的應用于電鏡檢查技術的一種示蹤技術.與傳統(tǒng)方法比較,由于膠體金具有肉眼可觀察的紅色,所

2、以以這種技術為基礎開發(fā)的檢測試劑盒有快捷、準確、高特異性、高敏感性的特點,靈敏度可達0.5~1ng/mL,適用于各級醫(yī)院、衛(wèi)生所、家庭個人診斷、保健、體檢.目前以此方法為基礎發(fā)展起來的檢測試劑盒涉及范圍相當廣泛,包括HCG等激素、腫瘤標志物、心血管標志物、傳染病的抗原與抗體的檢測等.采用檸檬酸鈉還原法制備膠體金顆粒,標記純化的雞新城疫抗體,并包被在玻璃纖維素膜上,另外將純化的雞新城疫抗體和純化的兔抗雞抗體包被在硝酸纖維素膜上,組裝成雞新

3、城疫快速診斷試紙條.當檢樣中含有雞新城疫病毒抗原時,試紙條上出現(xiàn)兩條紅線,為陽性;當檢樣中不含有雞新城疫病毒抗原時,試紙條出現(xiàn)一條紅線,為陰性.用本試驗研制的雞新城疫快速診斷試紙條檢測收集的20份樣品,其結果與HA結果相對應,符合率100％.當病毒HA效價在1:32以上時,試紙條均能檢測為陽性.雞新城疫快速診斷試紙條與已知的禽流感病料和雞傳染性支氣管炎病料的上清夜無交叉反應出現(xiàn).進行熱穩(wěn)定性試驗穩(wěn)定性好.試驗證明,該研究建立的膠體金免疫