蒙古黃芪的組織培養(yǎng).pdf

1、黃芪（Radix Astragali）是豆科（Leguminosae）蝶形花亞科（Papilionoideae）多年生草本植物，具有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。但由于近年來(lái)的過度采挖，致使野生黃芪資源幾近枯竭，不能滿足市場(chǎng)的需要，所以離體培養(yǎng)已成為增加黃芪產(chǎn)量的主要手段之一。本文以購(gòu)自甘肅省隴西縣的優(yōu)質(zhì)蒙古黃芪種子為材料，通過組織培養(yǎng)的方法建立其快速繁殖體系。
　　 蒙古黃芪快速繁殖體系的建立，主要是針對(duì)種子的消毒和萌發(fā)、外植體的

2、篩選、愈傷組織初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基、繼代增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的選擇，以及褐化現(xiàn)象的抑制進(jìn)行的。
　　 種子的消毒和萌發(fā)率的高低對(duì)于無(wú)菌條件下獲得外植體是很重要的。將蒙古黃芪種子浸泡在適量洗潔精10min中后，再依次進(jìn)行45s中75％的酒精浸泡和9.5min0.1％的升汞消毒，其萌發(fā)率可達(dá)100％，且不發(fā)生任何污染現(xiàn)象；另外，在低溫中存放半年和一年后的種子若經(jīng)過萌發(fā)前蒸餾水中10h的浸泡預(yù)處理，其萌發(fā)率可有大幅度提高，達(dá)到100％。<

3、br>　　 分別以蒙古黃芪的子葉、下胚軸和胚根作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在分別添加了NAA、2,4-D及6-BA的單一植物激素的MS培養(yǎng)基中，子葉均不能誘導(dǎo)出愈傷組織，而下胚軸在NAA 為1.0mg/L 時(shí)誘導(dǎo)率可達(dá)70％；在添加了不同生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素組合的培養(yǎng)基中，子葉誘導(dǎo)的愈傷組織褐化程度較輕，但誘導(dǎo)率均較低，而胚根的誘導(dǎo)率雖高于子葉，但褐化嚴(yán)重，只有下胚軸的誘導(dǎo)率最高，可達(dá)100％，雖仍有褐化現(xiàn)象發(fā)生但生長(zhǎng)旺盛。所以，

4、下胚軸是誘導(dǎo)蒙古黃芪愈傷組織的最佳外植體。
　　 培養(yǎng)基中的激素種類與濃度配比是影響蒙古黃芪初代培養(yǎng)、繼代增殖及生根培養(yǎng)的重要因素。其中，愈傷組織的最佳初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基是：MS+0.5或1.0mg/L6-BA+0.15mg/L NAA。在此激素中，愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)到100％；而繼代中仍可以此濃度來(lái)進(jìn)行增殖培養(yǎng)，這樣不僅可使愈傷組織達(dá)到較好的生長(zhǎng)效果而且還具有較高的增殖量。另外，在繼代培養(yǎng)時(shí)愈傷組織易發(fā)生褐化，當(dāng)用單一防褐劑對(duì)其進(jìn)

5、行抑制時(shí)，活性炭（AC）的作用不明顯，而一定濃度的Vc對(duì)愈傷組織的褐化則起到了較明顯的抑制效果；因而進(jìn)一步通過正交試驗(yàn)對(duì)綜合因素抑制褐化的效果做了對(duì)比，得出當(dāng)培養(yǎng)基中添加0.1mg/L Vc，前3天進(jìn)行暗培養(yǎng)，其余幾天進(jìn)行光培養(yǎng)(10h/d)，10天后繼代時(shí)，其褐化得到了較好的控制。在生根培養(yǎng)中，1/2MS+2.0mg/L NAA為最適生根培養(yǎng)基，其中誘導(dǎo)生根率可達(dá)到83.3％，若再向培養(yǎng)基中添加0.3％的活性炭（AC）時(shí)，則生根數(shù)量更