蒙古黃芪的組織培養(yǎng).pdf

1、黃芪（Radix Astragali）是豆科（Leguminosae）蝶形花亞科（Papilionoideae）多年生草本植物，具有很高的藥用價值和經(jīng)濟價值。但由于近年來的過度采挖，致使野生黃芪資源幾近枯竭，不能滿足市場的需要，所以離體培養(yǎng)已成為增加黃芪產(chǎn)量的主要手段之一。本文以購自甘肅省隴西縣的優(yōu)質(zhì)蒙古黃芪種子為材料，通過組織培養(yǎng)的方法建立其快速繁殖體系。
　　 蒙古黃芪快速繁殖體系的建立，主要是針對種子的消毒和萌發(fā)、外植體的

2、篩選、愈傷組織初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基、繼代增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的選擇，以及褐化現(xiàn)象的抑制進行的。
　　 種子的消毒和萌發(fā)率的高低對于無菌條件下獲得外植體是很重要的。將蒙古黃芪種子浸泡在適量洗潔精10min中后，再依次進行45s中75％的酒精浸泡和9.5min0.1％的升汞消毒，其萌發(fā)率可達100％，且不發(fā)生任何污染現(xiàn)象；另外，在低溫中存放半年和一年后的種子若經(jīng)過萌發(fā)前蒸餾水中10h的浸泡預(yù)處理，其萌發(fā)率可有大幅度提高，達到100％。<

3、br>　　 分別以蒙古黃芪的子葉、下胚軸和胚根作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在分別添加了NAA、2,4-D及6-BA的單一植物激素的MS培養(yǎng)基中，子葉均不能誘導(dǎo)出愈傷組織，而下胚軸在NAA 為1.0mg/L 時誘導(dǎo)率可達70％；在添加了不同生長素和細胞分裂素組合的培養(yǎng)基中，子葉誘導(dǎo)的愈傷組織褐化程度較輕，但誘導(dǎo)率均較低，而胚根的誘導(dǎo)率雖高于子葉，但褐化嚴重，只有下胚軸的誘導(dǎo)率最高，可達100％，雖仍有褐化現(xiàn)象發(fā)生但生長旺盛。所以，

4、下胚軸是誘導(dǎo)蒙古黃芪愈傷組織的最佳外植體。
　　 培養(yǎng)基中的激素種類與濃度配比是影響蒙古黃芪初代培養(yǎng)、繼代增殖及生根培養(yǎng)的重要因素。其中，愈傷組織的最佳初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基是：MS+0.5或1.0mg/L6-BA+0.15mg/L NAA。在此激素中，愈傷組織誘導(dǎo)率可達到100％；而繼代中仍可以此濃度來進行增殖培養(yǎng)，這樣不僅可使愈傷組織達到較好的生長效果而且還具有較高的增殖量。另外，在繼代培養(yǎng)時愈傷組織易發(fā)生褐化，當(dāng)用單一防褐劑對其進

5、行抑制時，活性炭（AC）的作用不明顯，而一定濃度的Vc對愈傷組織的褐化則起到了較明顯的抑制效果；因而進一步通過正交試驗對綜合因素抑制褐化的效果做了對比，得出當(dāng)培養(yǎng)基中添加0.1mg/L Vc，前3天進行暗培養(yǎng)，其余幾天進行光培養(yǎng)(10h/d)，10天后繼代時，其褐化得到了較好的控制。在生根培養(yǎng)中，1/2MS+2.0mg/L NAA為最適生根培養(yǎng)基，其中誘導(dǎo)生根率可達到83.3％，若再向培養(yǎng)基中添加0.3％的活性炭（AC）時，則生根數(shù)量更