我國(guó)不同地區(qū)辣椒疫霉群體遺傳結(jié)構(gòu)和抗藥性分析.pdf

1、由辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)引起的植物疫病是毀滅性的植物病害，嚴(yán)重影響著全世界蔬菜等農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。辣椒疫霉群體遺傳結(jié)構(gòu)和對(duì)殺菌劑的敏感性變化直接影響著病害的發(fā)生與流行。為有效防治植物疫病，本論文對(duì)來(lái)自全國(guó)6大地區(qū)（華東、華北、西南、西北、東北和華南）以及美國(guó)（1個(gè)）的55個(gè)辣椒疫霉菌株進(jìn)行了遺傳多樣性和對(duì)殺菌劑當(dāng)家品種的抗性分析，獲得如下的研究結(jié)果:
　　1、利用直接配對(duì)法測(cè)定了55

2、個(gè)辣椒疫霉菌株的交配型。結(jié)果顯示，我國(guó)不同地區(qū)菌株交配型為A1或A2，這兩種交配型在我國(guó)各地區(qū)都有分布。除華南地區(qū)只有A2交配型以外，其他地區(qū)A1和A2交配型的比例接近1∶1。
　　2、利用7對(duì)SSR引物(Pcap1、Pcap3、Pcap4、Pcap5、Pcap6、Pcap7和Pcap8)分析了辣椒疫霉群體的遺傳多樣性。①首先建立了SSR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)過(guò)程中一種基于熒光測(cè)序技術(shù)的高通量低成本分析技術(shù)TP-M13-SSR。②基于該技術(shù)

3、，利用這7對(duì)SSR引物檢測(cè)出21個(gè)等位基因，平均每個(gè)位點(diǎn)檢測(cè)出3個(gè)等位基因，每個(gè)位點(diǎn)至少可以檢測(cè)出2個(gè)等位基因。x2卡方檢驗(yàn)表明在7個(gè)SSR位點(diǎn)中，5個(gè)位點(diǎn)(Pcap1、Pcap4、Pcap6、Pcap7和Pcap8)的等位基因頻率差異極顯著。7對(duì)引物中，Pcap3的基因多樣性(Gene diversity)和多態(tài)性信息含量(Polymorphism Information Content)最高，Pcap8的基因多樣性和多態(tài)性信息含量最

4、低。③共鑒定出辣椒疫霉群體中存在32種SSR基因型，其中檢測(cè)出西南地區(qū)菌株具有8種基因型，AB是優(yōu)勢(shì)基因型，所占頻率為34％。在華北地區(qū)菌株中檢測(cè)出10種基因型，DG是主導(dǎo)基因型，所占的頻率為31％。在華東地區(qū)菌株中共檢測(cè)到12種基因型，其中基因型DI的比例最高，為21％。3個(gè)基因型(AA、AB和BD)各出現(xiàn)過(guò)2次，其余基因型都只出現(xiàn)了一次。④地區(qū)種群中，華東地區(qū)種群的遺傳多樣性最為豐富。美國(guó)菌株與中國(guó)菌株之間存在較強(qiáng)的遺傳分化。

5、>　　3、利用十字交叉法測(cè)定了辣椒疫霉菌株對(duì)甲霜靈、烯酰嗎啉和丁吡嗎啉的抗藥性。結(jié)果表明，丁吡嗎啉對(duì)辣椒疫霉的抑制效果最好，EC50值為0.2156-4.5993μg/mL,最不敏感菌株的EC50值為最敏感菌株的21.33倍。不同地區(qū)采集的菌株對(duì)甲霜靈、烯酰嗎啉和丁吡嗎啉的敏感性存在較大差異。
　　4、采用紫外誘變和藥劑馴化的方式獲得6個(gè)丁吡嗎啉抗性菌株，其抗性倍數(shù)在5.5645-73.7288之間。在不含藥的PDA(Potato

6、 Dextrose Agar)平板上轉(zhuǎn)代培養(yǎng)15代后，抗性菌株的抗藥性沒有丟失?？剐跃甑慕慌湫团c親本菌株一致，說(shuō)明抗藥性的產(chǎn)生不會(huì)影響交配型。抗性菌株在不含藥PDA培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率明顯低于親本菌株，說(shuō)明抗藥性的產(chǎn)生影響了菌絲的生長(zhǎng)速率。分析這些抗性菌株和12個(gè)對(duì)照菌株對(duì)氟嗎啉和雙炔酰菌胺的敏感性，發(fā)現(xiàn)辣椒疫霉菌株對(duì)丁吡嗎啉與對(duì)烯酰嗎啉、氟嗎啉和雙炔酰菌胺等其他CAA類的藥劑存在交互抗性。
　　本論文建立并利用TP-M13-SS