24067.擬南芥中一個(gè)與ank6互作的蛋白功能的初步研究

1、分類號(hào)——學(xué)校代碼!Q5壘2密級(jí)——學(xué)號(hào)2QQ墨!壘Q2QQ窆魚擬南芥中一個(gè)與ANK6互作的蛋白功能的初步研究PreliminaryStudiesontheFunctionofanANK6—interactingProteininArabidopsis指導(dǎo)教師姓名、職稱奎盔屋數(shù)拯塞盤邀拯湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室2011年4月摘要ANK6(ank刪nrepeatprotein6)屬于錨蛋白家族，包含三個(gè)ANK重復(fù)模體，作為接頭蛋白

2、介導(dǎo)蛋白與蛋白之間的相互作用。實(shí)驗(yàn)室的研究已發(fā)現(xiàn)，在擬南芥中，ANK6通過與轉(zhuǎn)錄因子SIG5相互作用調(diào)控雌雄配子的識(shí)別從而影響了擬南芥的雙受精的完成。篩選和鑒定線粒體中與ANK6相互作用的其他蛋白，對(duì)于闡明ANK6在精卵識(shí)別調(diào)控過程中的作用機(jī)制，具有重要的理論意義。應(yīng)用酵母雙雜、BiFC等生化、細(xì)胞學(xué)技術(shù)以及遺傳學(xué)研究手段，對(duì)一個(gè)與ANK6互作的“新“基因的功能進(jìn)行了初步的研究，結(jié)果如下：應(yīng)用酵母雙雜交的方法，以ANK6為“誘餌”篩選擬

3、南芥的cDNA文庫，獲得與之相互作用的候選蛋白Atl916870。序列比對(duì)等生物信息學(xué)分析顯示該蛋白與人的hDAP3蛋白同源，命名為AtDAP3，在擬南芥中是一個(gè)單基因蛋白。mAP3參與細(xì)胞線粒體內(nèi)蛋白的合成，以及調(diào)控細(xì)胞程序性死亡，而AtDAP3的功能未知。為了鑒定ANK6與AtDAP3的相互作用，利用酵母雙雜交及BiFC(雙分子熒光互補(bǔ))的方法，從體外和體內(nèi)兩個(gè)方面對(duì)其互作關(guān)系進(jìn)行了檢驗(yàn)，證實(shí)二者可以相互作用。通過GFP標(biāo)簽法構(gòu)建轉(zhuǎn)