擬南芥鋅指蛋白AtZFP6調(diào)控抗逆及互作蛋白的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、UniversityCode：10225RegisterCode：S15703DissertationfortheDegreeofMasterTheCharacterizationofZincFingerProteinAtZFP6FromArabidopsisthalianaRegulateStressandIneractProteinCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDe

2、greeAppliedfor：Speciality：DateofOralExamination：University：ShengnanLiuProfYuchengWangMasterForestTreeGeneticesandBreedingJune，2015NortheastForestryUniversityAbstractAbstractAtZFP6(AT5G186501)，isaC3HC4typezincfmgerprotein

3、whichcontainsmultiplefmgerlikeprotrusions，andisalsoaE3一typeubiquitinligaseThelengthofthegeneis804bp，encoding268aminoacidsThestudyhadmainlycarriedontheproteinsinteracted謝tIlAtZFP6protein，thetolerantabilityofAtZFP6tostress

4、，andtheregulationofAtZFP6tofloraldevelopmentFirstofall，webuiltAtZFP6genetoplantexpressionvectorpROKII；Afterwegottheplantoverexpressionvector35S：AtZFP6，wetransformedflowersofwildtypeArabidopsisthaliana謝tllAgrobacterium，wh

5、ichisthoughAgrobacteriummediatedfloraldipmethodplasmidintowildtypeArabidopsisplantsWiththeselectionmethod，wegottheT3generationhomozygousoverexpressionlines，OElandOE2Atthesametime，weusedthemethodofthreeprimerstoselectofho

6、mozygousmutantlinesSALKl(CS24967)andSALK2(CS82893)InordertostudywhetherAtZFP6associated誦tllstress，weusedOEl，OE2，SALKl，SALK2，35S(arabidopsistransformedwithemptypROKII，contr01)andWT(wildtype)seedswererespectivelydonewithdi

7、fferentconcentrationgradientJA，SA，ABAandNaClsolutions，afterthatwecalculatedthegerminationrates，rootlengthandfreshweight，thenanalyedtolerantabilityofAtZFP6respondedtothedifferentstress；Theexperimentalresultsshowedthattheg

8、erminationrates，rootlengthandfleshweightoftheselineshadnosignificantdifferencesunderJA，SA，ABAandNaClstressedWhileindicatedthat爿f卿6geneinarabidopsisstressprocessdidn’tworkata11ThenweobservedthewholelifecycleofOEl，OE2，SALK

9、l，SALK2，35sandWTlines，andanalyzedtheinfluenceofAtZFP6onplantgrowthanddevelopment；PhenotypicobservationresultsindicatedthattheAtZFP6couldobservablelydelaytheflorescenceinArabidopsisthalianaYeastdoublehybridizationtechniqu

10、ewasusedtostudytheproteinsinteractedwithAtZFP6protein；wetransformedAtZFP6intothepGBKT7vector，asBaitcarrierAtthesametimewesettranscriptionfactorsfromdifferentfamilyintopGADT7Rec，formedthePreylibraryThenwetransformedBaitca

11、rrierandPreylibraryintoY2HandY187yeastcompetentcellsrespectively，andweselectedthepositivetransformedyeaststoYeastTwoHybirdTherewereatotalof13，theseproteinsinteractedwithAtZFP6includingAT3G176092，AT3G568501andAT4G345901fr

12、ombZIPfamily，AT4G111401，AT3G604901andAT4G174901fromERFfamily，AT5G624702andAT4G051001fromMYBfamily，ATlG691201andATlG221301fromMADS—boxfamily，AT5G071001fromWRKYfamily，AT5G436501frombHLHfamilyandAT4G210801fromDoffamilyTostu

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