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1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼:10023學(xué)號:b2006231Myostatin在早期胚胎骨骼肌發(fā)育過程中的表達與可能功能所院:姓名:指導(dǎo)教師:學(xué)科專業(yè):研究方向:完成日期:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院周玉長朱大海教授生物化學(xué)與分子生物學(xué)骨骼肌早期發(fā)育2010年6月摘要Myostatin作為TGF13超家族成員之一,在骨骼肌生長發(fā)育過程中起著十分重要的作用。Myostatin基因敲除小鼠骨骼肌體積的大小是相應(yīng)野生型小鼠骨骼肌的2~3倍。其骨骼肌增大是
2、肌纖維增生和肥大共同作用的結(jié)果,Myostatin基因敲除小鼠脛骨前肌肌纖維的數(shù)量比相應(yīng)野生型小鼠多86%。而Myostatin基因自然突變的“雙肌“牛,骨骼肌的增大主要是肌纖維增生。在脊椎動物除魚類以外,成年動物中骨骼肌纖維的數(shù)量主要由胚胎期和胎兒期形成的骨骼肌纖維數(shù)量決定。出生后骨骼肌的發(fā)生主要由位于肌膜和基底膜之間的衛(wèi)星細胞激活、增殖和分化,最后與胚胎期和胎兒期形成的肌纖維融合使骨骼肌纖維增大。Myostatin基因敲除小鼠和“雙
3、肌牛’’骨骼肌纖維增多,提示Myostatin在骨骼肌發(fā)生的過程中就起著非常重要的作用。但到目前為止,對Myostatin在早期骨骼肌發(fā)育中的作用了解還沒有任何直接的報道。為了探討Myostatin在早期骨骼肌生畏發(fā)育中的作用,本研究用雞胚作為模式生物,通過整胚原位雜交和RTPCR的方法對雞胚早期骨骼肌發(fā)生過程中Myostatin的表達模式進行了系統(tǒng)分析。結(jié)果顯示,用RTPCR的方法最早可以在HHl5的雞胚檢測到Myostatin的表達
4、。用整胚原位雜交的方法最早可以檢測到Myostatin在HHl6的雞胚最前面的枕部體節(jié)中表達。隨著發(fā)育的進程,Myostatin的表達從前面的體節(jié)往后面的體節(jié)延伸;到HHl9的雞胚中,Myostatin在雞胚肢芽間體節(jié)的中央表達;到HH23~HH24的雞胚幾乎所有體節(jié)中均可以檢測到Myostatin的表達。在特定的體節(jié)中Myostatin先從體節(jié)生皮肌節(jié)的中央開始表達;隨著體節(jié)進一步分化,Myostatin的表達區(qū)域從生皮肌節(jié)的中央向生
5、皮肌節(jié)背中唇、腹側(cè)唇和肌節(jié)方向延伸。Myostatin從HHl7開始在舌下索中表達,隨著發(fā)育進程這種表達信號更強,從發(fā)育階段HH23的雞胚開始,Myostatin在將來形成舌骨骼肌區(qū)域表達信號開始減弱。在肢芽發(fā)育過程中,Myostatin最早在HH21的雞胚前后肢芽的近端中央部分表達;在隨后的發(fā)育過程中,Myostatin在肢芽中的表達從近端往肢芽的遠端延伸;有趣的是Myostatin在早期胚胎肢芽中的表達并不只是局限在形成骨骼肌的背側(cè)
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