2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文阿維菌素和高溫脅迫對朱砂葉螨γ氨基丁酸及其受體表達(dá)的影響姓名:盧文才申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):農(nóng)藥學(xué)指導(dǎo)教師:何林20090501西南大學(xué)碩士學(xué)位論文其爬行速度都比較緩慢:AbR、從SS品系汰選的抗性個體SSA及其下一代SS—AFl個體相對于SS品系均表現(xiàn)為行動遲緩(平均爬行速度分別為SS品系個體的623%、708%和764%);經(jīng)藥劑誘導(dǎo)8h后,SS品系個體活動速度明顯變慢(為誘導(dǎo)前7l%),而抗性個體活動速度變化不

2、顯著:HR品系和SS品系活動速度相當(dāng),無顯著差異;熱應(yīng)激后,SS和HR品系活動速度均變得緩慢(爬行速度分別為熱激前的742%和701%)。體內(nèi)GABA含量較高的朱砂葉螨的活動都受到不同程度抑制,從而間接驗(yàn)證GABA是無脊椎動物的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。四、分子克隆獲得一條GABA受體a亞基全長序列,Genbank登錄號為EU362111,命名尺川億。開放閱讀框(ORF)為1127bp,編碼376個氨基酸殘基,其中包括了由21個氨基酸組成的信號肽

3、。該基因編碼的氨基酸序列理論分子量為411kDa,等電點(diǎn)(pI)為925;57端有27bp的非編碼區(qū),3’端有555bp的非編碼區(qū)和polyA尾,第1681處有AATAAA加尾信號:與其他昆蟲、螨同源性搜索比較,發(fā)現(xiàn)與二班葉螨Tetranychusurticae、黑腹果粕rosophilamelanogasterGABA受體0【亞基同源性分別高達(dá)72%和71%。生物信息學(xué)分析表明,推導(dǎo)的R講n結(jié)構(gòu)也包含典型的GABA受體亞基的四個跨膜結(jié)

4、構(gòu)域,且第三結(jié)構(gòu)域至第四結(jié)構(gòu)域之間有一個明顯的親水區(qū);尺∥。氨基酸序列中存在高度保守的糖基化位點(diǎn)僻∥。氨基酸序列92N和133N)與磷酸化位點(diǎn)餌∥。氨基酸序列187Y,341S,346Y,362Y),另外還含有可能在螨類中是特有的糖基化點(diǎn)(60NinR∥。)與磷酸化點(diǎn)(48Sand339SinRdlr。);構(gòu)建分子進(jìn)化樹結(jié)果顯示,朱砂葉螨和二斑葉螨GABAR基因在GABAR類群中最為原始,在進(jìn)化樹里獨(dú)立于其他物種的GABAR。采用同樣的

5、方法得到了室內(nèi)選育的朱砂葉螨AbR品系GABAR的基因序列對SS品系和AbR品系核苷酸及推導(dǎo)的氨基酸序列進(jìn)行對位排列分析,結(jié)果顯示,兩品系核苷酸與氨基酸序列沒有差異。五、建立了基于SYBRGreenI染料技術(shù)的realtimePCR方法,以13actin基因作為內(nèi)參基因進(jìn)行校正,運(yùn)用實(shí)時定量PCR檢測SS品系、AbR品系GABA受體mRNA表達(dá)量。檢測結(jié)果為AbR品系的相對表達(dá)量顯著低于SS品系的表達(dá)量(僅為SS品系的14%,P0,(1

6、5),用SS品系LCso劑量的阿維菌素對朱砂葉螨AbR品系、SS品系誘導(dǎo)8h后,AbR品系GABA受體的表達(dá)量基本沒有變化,而SS品系表達(dá)量顯著降低(降為24%),HR品系GABAR表達(dá)量顯著低于SS品系(前者是后者的547%);熱激后,SS品系表達(dá)量顯著下降(降低了56,6%),而HR品系表達(dá)量有所降低,但無顯著差異。朱砂葉螨GABA受體mRNA表達(dá)下調(diào)介導(dǎo)了其對阿維菌素和高溫脅迫的適應(yīng)性。關(guān)鍵詞:朱砂葉螨,阿維菌素,高溫,丫氨基丁酸

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