多粘類芽孢桿菌生防促生機(jī)制研究及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、多粘類芽孢桿菌是一類能形成芽孢，可在逆境中良好生長(zhǎng)的根際促生菌。CF05菌株是一株從天目山柳杉上分離獲得的多粘類芽孢桿菌，具有潛在應(yīng)用價(jià)值。為進(jìn)一步明確其作用機(jī)制，本研究針對(duì)該菌株的生防促生機(jī)制開展研究，摸索發(fā)酵工藝，為該菌株作為生物農(nóng)藥開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下：
　　1.分別采用對(duì)峙法和雙層培養(yǎng)法，測(cè)定了CF05對(duì)番茄灰霉病菌、串珠鐮刀病菌、棉花枯萎病菌等8種真菌和葡萄根癌病菌、白菜軟腐病菌等4種細(xì)菌的拮抗活性，發(fā)現(xiàn)CF0

2、5對(duì)供試病原菌均具有明顯拮抗活性。
　　2.采用溫室試驗(yàn)，測(cè)定了CF05芽孢懸浮液對(duì)番茄根結(jié)線蟲病、番茄枯萎病鐵皮石斛葉斑病的防治效果以及促生效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)番茄根結(jié)線蟲的防治效果達(dá)到64.4％，對(duì)番茄枯萎病的防治效果達(dá)到78.24%，對(duì)鐵皮石斛細(xì)菌性葉斑病的防治效果達(dá)到63.6%。番茄和鐵皮石斛植株均表現(xiàn)出明顯促生效果，番茄鮮重提高了29.4%，干重提高38.4%。鐵皮石斛鮮重增長(zhǎng)74.6%，側(cè)芽增加195.8%。
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3、.采用抗性標(biāo)記和跟蹤檢測(cè)的方法，測(cè)定了CF05在番茄根圍的定殖能力，發(fā)現(xiàn)CF05能萌發(fā)并穩(wěn)定定殖，25天后，定殖濃度達(dá)到8.0×103CFU/g；采用高效液相色譜法，測(cè)定了CF05產(chǎn)吲哚乙酸的能力，發(fā)現(xiàn)CF05能產(chǎn)生IAA，其最高濃度達(dá)到5.35μg/ml；測(cè)定了番茄根部的PAL、PPO、POD和苯酚等植物誘導(dǎo)抗性關(guān)鍵酶活，發(fā)現(xiàn)CF05能明顯提高其活性；測(cè)定了CF05對(duì)不同農(nóng)藥的敏感性，發(fā)現(xiàn)CF05對(duì)大部分常見農(nóng)藥具有良好的抵抗力，僅對(duì)

4、部分殺菌劑敏感。完成了CF05的全基因組測(cè)序，獲得了全基因組圖譜。
　　4．通過正交試驗(yàn)和單因子試驗(yàn)方法，摸索了培養(yǎng)基配方、pH值、接種量、溫度對(duì)CF05產(chǎn)芽孢量的影響。獲得了最佳發(fā)酵培養(yǎng)基：20.0g/L玉米粉，10.0g/L豆粕，10.0g/L魚粉，5.0g/L磷酸氫二鉀，0.5g/L CaCl2，0.5g/L MgSO4和最佳發(fā)酵條件pH7.0，接種量2%，溫度30℃。進(jìn)行了100L中試發(fā)酵，制備了芽孢量為5×1010個(gè)/m