農(nóng)桿菌介導(dǎo)的將兩個(gè)與淀粉合成有關(guān)的基因?qū)胛覈?guó)秈稻恢復(fù)系中的研究.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文農(nóng)桿菌介導(dǎo)的將兩個(gè)與淀粉合成有關(guān)的基因?qū)胛覈?guó)秈稻恢復(fù)系中的研究姓名：吳方喜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：謝華安;王鋒20030501窒塹墮坌量竺塑堡塵蘭塞塑魚(yú)墮壹羞塑薹里曼壘塾宴塑塑堡墨墨! 塑墮——A b s t r a c tS t a r c h m a k e s u p a b o u t 9 0 ％o f t h e d r y m a t t e r c o n t e n t o

2、 f m i l l e d r i c e ，w h i c hi sd i v i d e di n t oa n a y l o s ea n d a m y l o p e c t i n ．I t p r o v e d t h a tt h e i rm o l e c u l a r s t r u c t u r ea n d c o m p o s i t i o n a lp r o p o r t i o n h

3、a v ei n f l u e n c e dc o o k i n ga n de a t i n go f r i c eq u a l i t y ．A tp r e s e n tq u a l i t y o f m o s to f r i c ec u l t i v a r si sv e r yp o o r , i ti sm a i n l yi n d u c e db yh i g ha m y l o s

4、e ，S o ，i ti si n c r e a s i n gt e n d e n c yt od e c r e a s ea m y l o s e c o n t e n t ．B u ti t i sv e r yd i f f i c u l tt oi m p r o v eS t a r c hQ u a l i t yb y r o u t i n e l yg e n e t i ci m p r o v e m

5、 e n t b e c a u s e o f e n d o s p e r m c h a r a c t e r i s t i co f a m y l o s e ．W i t h q u i c kd e v e l o p m e n t o f m o l e c u l a ra n d g e n ee n g i n e e r i n go f s t a r c h ，I ti sp o s s i b l

6、et oi m p r o v e r i c es t a r c hq u a l i t y b y g e n ee n g i n e e r i n g ．S o l u b l es t a r c hs y n t h a s ee n z y m e g e n eS S S a n d s t a r c hb r a n c h i n ge n z y m e g e n e R B E l h a v eb e

7、 e n i n t r o d u c e di n t or i c er e s t o r i n g l i n eH a n g I h a o ( I n d i c a S a l i v a L ．) a n d M i n h u i 8 1 ( I n d i c a S a t i v a L ．) b yA g r o b a c t e r i u m ．m e d i a t e d t r a n s f

8、 o r m a t i o n a n d t r y t o f i n d o u t t h e p o s s i b i l i t y o fm a n i p u l a t i o no f l n d i c aR i c eS t a r c hQ u a l i t yv i aG e n e t i cE n g i n e e r i n g ．N o w , t h i sr e p o r tw a s

9、s u m m a r i z e d a sf o l l o w i n g ：1 ．F o r w a r d e x p r e s s i o n s o l u b l e s t a r c h s y n t h a s e g e n e S S Sa n d f o r w a r d o r r e v e r s ee x p r e s s i o ns t a r c hb r a n c h i n ge

10、n z y m eg e n eR B E lw a si n t r o d u c e di n t or i c er e s t o r i n gl i n eH a n g 1 h a oa n d M i n h u i 8 1b y A g r o b a c t e r i u m - m e d i a t e d t r a n s f o r m a t i o n ．W eh a v et o t a l l

11、yo b t a i n e d4 5H a n g1 h a oa n d 7 1M i n h u i 8 1 i n d e p e n d e n t t r a n s g e n i cp l a n t s ．X 。d e t e c t i n gs h o w e d t h a tt h em a j o r i t yo f T o g e n e r a t i o nt r a n s g e n i cp l

12、 a n t sa c c o r d e dw i t hM e n d e l i a n s e g r e g a t i o n ( 3 ：1 ) ．2 ．P C Ra n d S o u t h e r n b l o t s h o w e dt h a t s o l u b l e s t a r c h s y n t h a s e g e n e a n d s t a r c hb r a n c h i n

13、g e n z y m e g e n e h a v e b e e n i n t e g r a t e di n t or i c eg e n o m e a n d e x p r e s s e d ．3 ．A m y l o s e c o n t e n to f T o g e n e r a t i o n s e e d s a n a l y s i ss h o w e d ：T h e q u a n t

14、i t yo f a m y l o s e o ff o r w a r de x p r e s s i o n s t a r c hb r a n c h i n ge n z y m eg e n eh a dr e d u c e dc o m p a r e dt o t h eo r i g i n a ls p e c i e s ，t h eb i g g e s td e c r e a s i n gr i f

15、l ea r r i v e d3 4 ，6 8 ％，t h eq u a n t i t yo f a m y l o s eh a d d e c r e a s e d t o9 ．6 ％i nH a n gl h a o ．T h eq u a n t i t yo f a r n y l o s eo f f o r w a r d e x p r e s s i o ns o l u b l es t a r c hs y

16、n t h a s eg e n eo fM i n h u i 8 1h a dr e d u c e dm a r k e d l yc o m p a r e dt o t h eo r i g i n a l s p e c i e s ，t h e b i g g e s td e c r e a s i n gr a t e a r r i v e d2 1 ．4 5 ％，a n dt h eq u a n t i t yo

17、 fa m y l o s eh a dd e c r e a s e dt o9 ．9 1 ％i nM i n h u i 8 1 ．T h eq u a n t i t yo f a r n y l o s eo f f o r w a r de x p r e s s i o ns t a r c hb r a n c h i n g e n z y m eg e n eh a d a l s or e d u c e dc o

18、m p a r e d t ot h eo r i g i n a ls p e c i e s ，t h eb i g g e s t d e c r e a s i n gr a t ea r r i v e d2 1 ．8 7 ％，a n dt h eq u a n t i t yo f a m y l a s eh a dd e c r e a s e d t o 9 ．9 1 ％i n M i n h u i 8 1 ．W h

19、 i l e t h e q u a n t i t y o f a m y l o s e o fr e v e r s ee x p r e s s i o ns t a r c hb r a n c h i n ge n z y m eg e n e ，b i g g e s ti n c r e a s i n g r a t e a r r i v e d 16 ．9 5 ％c o m p a r e d t ot h eo