轉(zhuǎn)基因蘋果對微生物群落數(shù)量及植株花粉育性影響研究.pdf

1、隨著轉(zhuǎn)基因作物的商品化和種植種類、面積的的不斷增加，以及人類安全意識的提高，轉(zhuǎn)基因作物的生態(tài)安全問題也越來越引起人們的關(guān)注。本試驗選用繼代保存13年的轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果組培苗和定植8年的田間轉(zhuǎn)基因植株，研究外源基因在受體植株根系的穩(wěn)定遺傳性;分析外源基因在土壤殘留情況;分析外源基因在土壤可培養(yǎng)微生物存在情況;研究轉(zhuǎn)基因植株對根際微生物的影響;本實驗室研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因蘋果花粉離體萌發(fā)率和花粉生活力都顯著低于非轉(zhuǎn)基因蘋果，本試驗通過顯微觀察轉(zhuǎn)

2、基因蘋果花粉形成過程，探索導(dǎo)致以上現(xiàn)象的原因。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.對繼代培養(yǎng)13年的嘎拉、王林、富士共129株轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果組培苗的根系進行PCR檢測，結(jié)果表明:129株組培苗的根系均擴增出了CpTI特異基因片斷，說明外源CpTI基因在轉(zhuǎn)基因蘋果組培苗根系形成過程中，沒有發(fā)生丟失。
　　 2.對定植田間8年的8個株系的轉(zhuǎn)CpTI基因蘋果的根際土、根圍土、表層土進行PCR檢測，結(jié)果表明:轉(zhuǎn)基因

3、蘋果根際土和根圍土全部檢測到了CpTI基因;轉(zhuǎn)基因蘋果的表層土的2個株系檢測到了外源CpTI基因，說明外源CpTI基因在轉(zhuǎn)基因植株根系土壤存在殘留。
　　 3.培養(yǎng)檢測到外源基因的表層土、根圍土、根際土的微生物，得到262株細菌、189株放線菌和146株真菌，對其進行PCR檢測，所有可培養(yǎng)細菌、放線菌和真菌均沒有檢測到外源CpTI基因。
　　 4.用無菌蛭石∶草炭(1∶1)的基質(zhì)，加入微生物菌肥，統(tǒng)計栽種30d、60 d

4、和90 d的轉(zhuǎn)基因蘋果（嘎拉、王林、富士）根際土細菌、放線菌和真菌的數(shù)量，結(jié)果表明:30d時，轉(zhuǎn)基因蘋果根際土細菌、真菌數(shù)量顯著高于對照;60d時，轉(zhuǎn)基因蘋果根際土真菌數(shù)量顯著高于對照，轉(zhuǎn)基因王林細菌數(shù)量顯著低于對照;90d時，轉(zhuǎn)基因富士真菌數(shù)量顯著高于對照，轉(zhuǎn)基因蘋果細菌數(shù)量與對照差異不顯著;轉(zhuǎn)基因蘋果根際土放線菌數(shù)量與對照差異均不顯著。
　　 5.三月中旬至四月上旬，每隔3d采集轉(zhuǎn)基因蘋果的花蕾（花芽），采用石蠟切片法，顯微