蛇源細(xì)菌的分離與鑒定.pdf

1、特種蛇類養(yǎng)殖目前成為廣西農(nóng)村新興的致富產(chǎn)業(yè)，但是隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和養(yǎng)殖方式的改變，蛇類的疾病也日漸增多，嚴(yán)重地影響和制約著蛇類養(yǎng)殖規(guī)模、生產(chǎn)水平和經(jīng)濟(jì)效益。為了對(duì)蛇類細(xì)菌性疾病的病原進(jìn)行調(diào)查，保障廣西特種養(yǎng)蛇的健康發(fā)展，本研究采用細(xì)菌分離法，在無(wú)菌條件下，將病蛇的心、肝、肺等實(shí)質(zhì)器官接種于鮮血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24h，分離到30株細(xì)菌。其中未能純培養(yǎng)的有13株，可純培養(yǎng)的有17株，經(jīng)革蘭氏染色，13株為革蘭氏陰性細(xì)菌，4株為革蘭

2、氏陽(yáng)性細(xì)菌。純培養(yǎng)的17株細(xì)菌在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、SS營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上表現(xiàn)不同的生長(zhǎng)形態(tài)。
　　 采用PCR方法，提取分離純化的細(xì)菌基因組DNA，利用細(xì)菌16S rRNA序列通用引物16S-1492R和16S-27F進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序，獲得菌株16S rRNA基因序列，用NCBI-BLAST軟件將測(cè)序序列在Genbank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行同源性檢索，初步確定細(xì)菌的種屬。再根據(jù)菌株在生化反應(yīng)管中的特征性反應(yīng)對(duì)細(xì)菌種屬進(jìn)行