絨山羊骨骼肌miRNAs及其靶基因表達(dá)譜分析.pdf

1、內(nèi)蒙古絨山羊是內(nèi)蒙地區(qū)的特色家畜品種，除了其優(yōu)良的產(chǎn)絨性能，山羊肉也具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，但目前對其肉質(zhì)基因調(diào)控方面的研究較少。本研究以肌肉相關(guān)基因miR-1、miR-133、miR-24和脂肪相關(guān)基因miR-103、miR-122、miR-143及廣泛表達(dá)的基因let7為研究對象，通過SYBR熒光定量PCR對各miRNA在絨山羊骨骼肌中的表達(dá)進(jìn)行分析，并利用MTFP技術(shù)初步篩選各miRNA所調(diào)控的靶基因，之后建立絨山羊骨骼肌細(xì)胞系，選取

2、miR-133構(gòu)建表達(dá)載體并進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染試驗(yàn)，得到如下結(jié)果：
　　1、研究所選取的7個miRNA在絨山羊骨骼肌中的表達(dá)量依次為：miR-1>miR-133>miR-24>let7>miR-143>miR-103>miR-122，其中miR-1和miR-133的表達(dá)規(guī)律相似，且肌肉相關(guān)miRNA比脂肪相關(guān)miRNA的表達(dá)量高，此外多數(shù)miRNA在成年公羊背最長肌中表達(dá)量最高，在成年母羊背最長肌中有最低表達(dá)量；
　　2、利用MT

3、FP技術(shù)批量篩選到98個靶基因，各miRNA具有各自的MTFP譜征，且不同miRNA在背最長肌和后腿肌中的靶基因表達(dá)量差別較小，通過測序所得到的SYNM、ALDOA、TLK2等靶基因候選基因參與細(xì)胞分裂、能量傳遞、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等過程；
　　3、建立了絨山羊骨骼肌細(xì)胞系，為后續(xù)細(xì)胞驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)提供物質(zhì)基礎(chǔ)；
　　4、對miR-133構(gòu)建的pre-miR-133表達(dá)載體通過轉(zhuǎn)染成功進(jìn)入細(xì)胞，但在加工成成熟miR-133的過程中出現(xiàn)問題，