絨山羊PH-30基因克隆及其組織表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、精卵結(jié)合機(jī)制的研究，一方面是動(dòng)物受精生理的一個(gè)重要理論問(wèn)題，另一方面在免疫避孕及免疫不孕等實(shí)際應(yīng)用中也具有重要意義。PH-30是參與精卵質(zhì)膜間相互作用中最有特征性的候選分子之一，其作為少數(shù)幾種在精卵質(zhì)膜結(jié)合與融合中發(fā)揮重要作用的精于膜表面蛋白之一，是多種哺乳動(dòng)物精子膜均具有的重要蛋白。
　　 本研究克隆了絨山羊PH-30基因。首先，從公山羊睪丸組織提取總RNA，以此為模板，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，根據(jù)GenBank中公布的4種動(dòng)物P

2、H-30cDNA序列的保守區(qū)設(shè)計(jì)一對(duì)引物，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得448 bp的目的DNA片段。然后，用RT-PCR方法和Northern雜交技術(shù)在mRNA水平上檢測(cè)PH-30在絨山羊睪丸組織和附睪組織不同部位中的表達(dá)。最后運(yùn)用RACE技術(shù)獲得絨山羊PH-30基因的全長(zhǎng)cDNA序列。通過(guò)上述研究得如下結(jié)論：
　　 1、采用RT-PCR方法克隆了絨山羊PH-30基因，經(jīng)核苷酸序列分析，與綿羊PH-30核苷酸序列同源性達(dá)99％，與牛的同源性

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