黃粉蟲抗菌肽誘導(dǎo)方法的比較及實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析.pdf

1、為了給黃粉蟲抗菌肽研究提供新的參考，探索黃粉蟲抗菌肽的較優(yōu)誘導(dǎo)方法，本論文以不同齡期的黃粉蟲幼蟲為試驗(yàn)材料，以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作為誘導(dǎo)菌，微量注射、飼喂和針刺作為誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)黃粉蟲幼蟲產(chǎn)生抗菌肽，對不同菌液濃度和不同方法誘導(dǎo)的不同齡期黃粉蟲幼蟲抗菌肽的抑菌效果進(jìn)行研究，同時(shí)還進(jìn)行了黃粉蟲抗菌肽Tenecin1、Tenecin3、Tenecin4及Coleoptericin C四個(gè)基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究。結(jié)果如下：
　

2、　1、不同齡期的黃粉蟲幼蟲產(chǎn)生的抗菌肽抑菌活性上存在差異。采用大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作為誘導(dǎo)菌，對8齡、9齡和10齡的黃粉蟲幼蟲進(jìn)行誘導(dǎo)后,發(fā)現(xiàn)其抗菌肽抑菌活性存在差異，在所有的誘導(dǎo)處理中，9齡幼蟲的誘導(dǎo)效果好于8齡和10齡。
　　2、不同菌液濃度誘導(dǎo)黃粉蟲幼蟲產(chǎn)生的抗菌肽抑菌活性上存在差異。將對數(shù)期濃度稀釋10倍、100倍、1000倍，經(jīng)3種不同濃度的菌液誘導(dǎo)后發(fā)現(xiàn)，在所有的不同菌液濃度誘導(dǎo)處理中，菌液濃度為對數(shù)期濃度的稀釋1

3、00倍時(shí)效果較好。
　　3、不同方法誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗菌肽抑菌活性上存在差異。經(jīng)相同濃度菌液誘導(dǎo)后發(fā)現(xiàn)，在所有的相同濃度菌液不同誘導(dǎo)方法處理中，微量注射誘導(dǎo)的效果較好。
　　4、黃粉蟲抗菌肽Tenecin基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR結(jié)果。通過對黃粉蟲抗菌肽的Tenecin1、Tenecin3、Tenecin4和Coleoptericin C4個(gè)基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析后發(fā)現(xiàn)，除Tenecin3基因經(jīng)大腸桿菌誘導(dǎo)表達(dá)量下調(diào)外，其他抗