轉(zhuǎn)PEPCK-1基因豬的生物安全評價.pdf

1、隨著動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)在育種新材料創(chuàng)制、生物反應(yīng)器、醫(yī)藥、食品以及生物學(xué)基礎(chǔ)研究等方面的應(yīng)用日益廣泛,轉(zhuǎn)基因動物的生物安全問題也越來越為人們所關(guān)注。然而,由于對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的科學(xué)普及等工作開展不足、科學(xué)家與媒體以及大眾的溝通存在問題等原因,尤其是相關(guān)評價體系、內(nèi)容、方法的建立等還不健全,使得人們對這一嶄新領(lǐng)域知之相對甚少。在轉(zhuǎn)基因家畜中,水平基因轉(zhuǎn)移或轉(zhuǎn)基因的無意釋放對生物多樣性有何影響,以及基因修飾對健康動物的潛在威脅、產(chǎn)品安全性等都是人們

2、非常關(guān)心的問題。
　　本研究以轉(zhuǎn)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)-1基因的體細(xì)胞克隆母豬為研究對象,通過檢測其糞便、接觸的土壤以及血液中DNA是否發(fā)生了水平基因轉(zhuǎn)移評估其環(huán)境安全性;通過檢測血液生理生化指標(biāo)來評估自身健康狀況,以及轉(zhuǎn)基因豬母乳(PEPCK-1母乳)飼喂普通仔豬健康狀況,來評估轉(zhuǎn)基因動物的產(chǎn)品對其他動物的影響。
　　為了評估轉(zhuǎn)基因豬的環(huán)境安全性,采取了三種方法:
　　1)利用PCR技術(shù)檢測水平基因轉(zhuǎn)移

3、,即考察是否有外源基因轉(zhuǎn)移到了普通豬血液、腸道菌或土壤微生物中。結(jié)果顯示,血液、腸道菌和土壤微生物的基因組中均未檢測到外源基因。
　　2)利用PCR檢測轉(zhuǎn)基因陽性豬進(jìn)行本交過的公豬和飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的仔豬是否發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移。結(jié)果表明,進(jìn)行本交的公豬和飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的仔豬同樣沒有發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移。
　　3)利用生理生化的方法測定糞便和土壤中的營養(yǎng)元素,進(jìn)而評價轉(zhuǎn)基因陽性豬代謝變化和土壤營養(yǎng)結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),土壤和糞便中

4、營養(yǎng)元素的變化很可能是由土壤空間距離上差異和豬個體之間差異的引起的,而與外源基因無相關(guān)性。以上結(jié)果表明所研究的轉(zhuǎn)基因陽性豬對環(huán)境安全可能無影響。
　　為了考察轉(zhuǎn)基因陽性豬的健康狀況,開展了生長性能測定、血常規(guī)、血清生理生化分析、免疫指標(biāo)測定、生殖激素水平監(jiān)測。結(jié)果如下:
　　1)在測定的生長性能指標(biāo)中,轉(zhuǎn)基因陽性豬在2、3月齡時體重、日增重明顯高于普通豬,與對照組比較差異顯著。雖然4、5月齡差異不顯著,但其平均體重、日增重仍

5、然優(yōu)于對照組。
　　2)在測定的7項血常規(guī)指標(biāo)中,實驗組和對照組比較,在6月齡時白細(xì)胞(WBC)測定值差異顯著。其他未見顯著差異。
　　3)在測定的14項血清生理生化指標(biāo)中,6月齡甘油三酯(TG)含量實驗組與對照組差異顯著,在3、7月齡總蛋白(TP)含量實驗組顯著低于對照組,并且在整個試驗階段TG含量均偏低。其他生化指標(biāo)轉(zhuǎn)基因陽性豬與對照組之間沒有顯著性差異。
　　4)免疫指標(biāo)中,IgG含量在6月齡實驗組顯著高于對照組

6、。
　　5)生殖激素水平檢測結(jié)果表明,A1轉(zhuǎn)基因母豬基本符合母畜在發(fā)情期內(nèi)生殖激素變化的規(guī)律,A2轉(zhuǎn)基因母豬可能受外界因素的影響出現(xiàn)了生殖機(jī)能紊亂,但其生殖激素水平處于正常范圍。由以上結(jié)果可初步推測,除去繁殖性能方面,外源基因(PEPCK-1)對轉(zhuǎn)基因豬的身體健康未見明顯的影響。
　　最后,為了研究轉(zhuǎn)基因豬母乳對普通仔豬健康的影響,通過給仔豬飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的試驗組與飼喂普通乳的對照組來比較其差異,實驗開始后每周稱量一次豬的