SLCO1B3基因在縉云麻鴨輸卵管中表達(dá)與蛋殼顏色的相關(guān)研究.pdf

1、蛋鴨的青殼性狀一直以來都是選育的重要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)，能夠選育出含有穩(wěn)定遺傳的青殼蛋系具有重要的經(jīng)濟(jì)意義。為了篩選純合青殼系，本實(shí)驗(yàn)根據(jù)系譜信息，挑選具有高產(chǎn)性能的縉云麻鴨青殼系公鴨40只，按照120的比例與產(chǎn)白殼蛋的縉云麻鴨配對，組成40令家系（F0代），進(jìn)行測交實(shí)驗(yàn)。根據(jù)F1代蛋殼顏色辨別父代公鴨是否為青殼純合型，結(jié)果表明有6只公鴨為含有純合青殼基因型。
　　目前應(yīng)用最多的青殼性狀選育方法還是以傳統(tǒng)育種的方式進(jìn)行，雖然近幾年分子育種技

2、術(shù)不斷發(fā)展，針對蛋鴨青殼性狀的候選基因也有報(bào)道，但是將實(shí)驗(yàn)室研究成果應(yīng)用在實(shí)際生產(chǎn)的還沒有報(bào)道，本次試驗(yàn)將進(jìn)行SLCO1 B3基因表達(dá)量與青殼性狀相關(guān)性研究，旨在為縉云麻鴨的青殼性狀選育提供候選基因。
　　實(shí)驗(yàn)中以縉云麻鴨青殼系與白殼系的測交子代為研究對象，隨機(jī)采取四只產(chǎn)青殼蛋和四只產(chǎn)白殼蛋的母鴨輸卵管子宮部組織，根據(jù)NCBI上查找到的雞SLCO1B3基因的序列，與其他物種的基因序列進(jìn)行比對后，找到保守的區(qū)域，設(shè)計(jì)跨內(nèi)含子的引物，

3、利用SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)，采用相對定量的方法，以β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)為內(nèi)參，檢測SLCO1B3基因在青殼與白殼系的不同個(gè)體的輸卵管子宮部的表達(dá)情況，利用2-△△Q分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果;發(fā)現(xiàn)SLCO1 B3基因在產(chǎn)白殼系輸卵管子宮部的表達(dá)量要高于在青殼系輸卵管子宮部，且差異顯著(P＜0.05)，初步推測該基因可以作為鑒別蛋鴨青殼性狀的候選基因之一。
　　基因調(diào)控區(qū)域一般處在基因的上游位置，為進(jìn)一

4、步研究SLCO1B3基因在青殼系和白殼系中表達(dá)量差異的機(jī)制，我們克隆了SLCO1 B3基因的5'-UTR區(qū)域序列，將會(huì)對后續(xù)研究其表達(dá)調(diào)控機(jī)制打下良好的理論基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)中以產(chǎn)白殼蛋的縉云麻鴨輸卵管子宮部提取的RNA為材料，擴(kuò)增出SLCO1B3基因5'-UTR區(qū)域。測序結(jié)果顯示通過5'-RACE技術(shù)得到了一段長度約為320bp大小的一段序列，利用NCBI比對發(fā)現(xiàn)這段基因與雞的LOC422031和LOC422032基因具有83％的相似率，說明