桃砧木毛桃離體培養(yǎng)和植株再生的研究.pdf

1、建立高效穩(wěn)定的離體再生體系是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)和前提。桃的離體再生較為困難，很大程度上阻礙了桃現(xiàn)代生物技術(shù)育種的進(jìn)程。本試驗(yàn)以南方桃區(qū)主要砧木毛桃(Prunus persica)為試材，利用莖段離體培養(yǎng)獲得的無(wú)菌苗葉片為外植體，通過(guò)對(duì)基本培養(yǎng)基類型、激素種類和濃度配比，碳源和暗培養(yǎng)時(shí)間等一系列因素的研究，初步建立了桃砧木毛桃葉片離體再生和愈傷組織誘導(dǎo)、保存及植株再生體系，為桃后續(xù)的遺傳轉(zhuǎn)化研究奠定了一定的基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：

2、　　 1.2010年5-6月進(jìn)行毛桃莖段腋芽誘導(dǎo)，萌發(fā)率可達(dá)76.6%，且生長(zhǎng)狀況良好。毛桃試管苗較適宜的增殖培養(yǎng)基為：LP基本培養(yǎng)基+6-BA0.75 mg/L+IBA0.30mg/L+腺嘌呤3.00 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，pH為5.8-6.0，每隔30 d左右繼代一次。
　　 2.在毛桃葉片植株再生時(shí)先進(jìn)行21 d的暗培養(yǎng)后更換到新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行光培養(yǎng)，暗光培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基均為：SH基本培養(yǎng)基+TD

3、Z3.0 mg/L+NAA0.3 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L，pH為5.8-6.0，最高再生率可達(dá)11.67%。
　　 3.毛桃試管苗較適宜的生根培養(yǎng)基為：1/2LP基本培養(yǎng)基+IBA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖20.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，pH為5.8-6.0。培養(yǎng)30 d生根率可達(dá)73.34%，平均每棵試管苗生根條數(shù)為3條，平均根長(zhǎng)為4.81 cm。
　　 4.毛桃葉

4、片愈傷組織誘導(dǎo)較佳培養(yǎng)基為：LP基本培養(yǎng)基+6-BA1.0 mg/L+2，4-D3.0 mg/L+AgNO30.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L，pH5.8-6.0，選取繼代30 d左右的毛桃試管苗的幼嫩莖段(不帶腋芽)或葉片作為外植體，暗培養(yǎng)21d后轉(zhuǎn)移至光培養(yǎng)。
　　 5.毛桃愈傷組織繼代保存的較佳培養(yǎng)基為：LP基本培養(yǎng)基+2，4-D1.5mg/L+CH0.4 g/L+CA3.0 g/L或PVP3.0