甘薯(ipomoeabatataslam.)離體植株再生體系的建立及生理生化研究

1、西南師范大學碩士學位論文甘薯(IpomoeabatatasLam.)離體植株再生體系的建立及生理生化研究姓名：龔一富申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：高峰2000.5.1西南師范大學碩士學位論文 甘薯離體植株再生體系的建立及生理生化研究不定芽，并再生成完整植株。當培養(yǎng)基中添加1 ．0m g ／lN A A 時效果最好，其植株再生頻率可達8 6 ．2 ％。培養(yǎng)基中添加A g N 0 3 抑制不定根的形成和莖段外植體不定芽的分化，但明

2、顯促進甘薯葉片外植體的植株再生。其中，A g N 0 3 濃度以6 m g ／1 或8 m g ／1 時效果最佳，其植株再生頻率最高可達6 8 ．8 ％。酪蛋白水解物( C H ) 對甘薯不定根和不定芽的分化具有抑制作用。不同基因型間不定芽的分化存在差異，甘薯品種新大紫的莖段外植體不定芽的分化頻率最高，達1 0 0 ％，而綿粉1 號最差，為6 5 ．4 ％。在所試的三種外植體中，莖段不定芽分化能力最強，葉片次之，而葉柄最差。不同接種部位

3、也對甘薯外植體器官分化有一定的影響。對甘薯離體培養(yǎng)過程中培養(yǎng)物內的各項生理生化指標進行了分析，結果表明，各項生理生化指標的變化與甘薯不定根和不定芽的分化有一定的關系。甘薯外植體中內源激素含量的高低直接影響愈傷組織的誘導和分化的難易。內源A B A 和i P A s 含量高的莖段外植體，易于產生不定根和不定芽的分化，內源A B A 和G A 3 含量低的葉柄易于誘導產生愈傷組織。離體培養(yǎng)過程中，當不定根或不定芽形成時，內源A B A 、G

4、 A 3 、i P A s 含量最高，P O D 、S O D 酶活性最大，而不定根或不定芽形成之后，內源A B A 、G A 3 、i P A s 含量下降，P O D 、S O D 酶活性降低。莖段、葉片和葉柄外植體在不定根和不定芽分化過程中，可溶性蛋白質含量變化呈下降趨勢。這說明，內源激素、P O D 、S O D 、可溶性蛋白質對甘薯不定根和不定芽形態(tài)發(fā)生的起動有重要作用。在甘薯外植體不定根和不定芽形成過程中，出現(xiàn)了三條新的可溶

5、性蛋白質譜帶，且譜帶顏色逐漸變深，另有三條譜帶顏色變淺。說明蛋白質在離體培養(yǎng)過程中進行著復雜的生理生化變化。在離體培養(yǎng)第5d 時，在陰極端出現(xiàn)了三條新P O D 同工酶酶帶，而此時不定根開始形成，說明P O D 同工酶酶譜的變化與甘薯器官發(fā)生有一定的關系。在添加A g N 0 3 的培養(yǎng)基上離體培養(yǎng)時，外植體內部的P O D 和S O D 酶活性變化也與不定根和不定芽的發(fā)生有一定的關系。在甘薯外植體不定根和不定芽形成時，P O D 和S

6、 O D酶活性保持較高水平，出現(xiàn)一個活性高峰，而當不定根和不定芽形成后，P O D 和S O D 酶活性下降。在此過程中，外植體可溶性蛋白質含量無明顯變化。不同濃度A g N 0 3 對甘薯外植體中內源A B A 、i P A s 及可溶性蛋白質的含量影響較大。隨著A g N 0 3 濃度的提高，內源A B A 、i P A s 含量均先增加后減少，可溶性蛋白質含量減少。一定濃度的A g N 0 3 使外植體內的內源A B A 、i P