論文隨著社會和人民生活水平的提高_第1頁
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文檔簡介

1、<p>  啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

2、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊,人們對畜產品安全的要求越來越高.為禁止非法使用萊克多巴胺藥物飼喂動物,確保動物產品安全,保障人體健康和促進畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展,根據國家有關法律和標準,制定本...啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

3、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊</p><p><b>  前 言</b></p><p>  隨著社會和人民生活水平的提高,人們對畜產品安全的要求越來越高。為禁止非法使用萊克多巴胺藥物飼喂動物,確保動物產品安全,保障人體健康和促進畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展,

4、根據國家有關法律和標準,制定本標準。</p><p>  本標準由福建省農業(yè)廳提出并歸口。</p><p>  本標準由福建省質量技術監(jiān)督局批準。</p><p>  本標準由福建省動物衛(wèi)生監(jiān)督所、福州市獸醫(yī)衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所負責起草。</p><p>  本標準主要起草人: </p><p>  動物尿樣中萊克多巴胺的測

5、定</p><p><b>  范圍</b></p><p>  本標準規(guī)定了以酶聯(lián)免疫(ELISA)法檢測動物尿液中萊克多巴胺殘留量的方法。</p><p>  本標準適用于飼養(yǎng)場動物和調運、交易及屠宰前動物尿液中萊克多巴胺殘留量的測定。</p><p><b>  規(guī)范性引用文件</b><

6、/p><p>  下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。</p><p>  GB/T 6682  分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法</p><p><b>  試樣制備</b></p>&

7、lt;p>  采集的尿樣應保存于4℃左右的冰箱中。尿樣如有混濁,應經離心處理。</p><p><b>  原理</b></p><p>  本方法是酶聯(lián)免疫法中的競爭性測定法,其主要原理是:微孔先用萊克多巴胺多抗包被,標準或樣品中的萊克多巴胺和酶標記的萊克多巴胺競爭性地與吸附在微孔內的萊克多巴胺多抗相結合,未結合的酶標記物被洗滌去除后,只剩下與微孔內抗體相結合

8、的酶標記物,其再與加入的酶底物相結合,酶底物在酶作用下產生藍色產物,吸光度的高低與樣品中萊克多巴胺的含量成反比。</p><p><b>  試劑和材料</b></p><p>  萊克多巴胺酶聯(lián)免疫試劑盒或類似產品。</p><p>  水為去離子水,符合GB/T 6682二級水的規(guī)定。</p><p><b&g

9、t;  儀器與設備</b></p><p>  微孔板酶標儀(帶450nm濾光片)。</p><p><b>  微量振蕩器。</b></p><p><b>  離心機。</b></p><p>  微量加樣器及配套吸頭:10-200μL不同的微量加樣器, 50-100μL多通道加樣器

10、 。</p><p><b>  冰箱。</b></p><p>  測定步驟(不同品牌的試劑盒可能略有差別,具體可根據試劑盒使用說明書略作調整)。</p><p><b>  樣品處理</b></p><p>  7.1.1清澈尿樣直接用于檢測直接加入微孔進行ELISA測定。</p>

11、<p>  7.1.2尿液樣品比較混濁時2000g離心5min或過濾,用上清液檢測。</p><p>  試劑準備(所有試劑應貯存于2-6℃,不得冷凍,并在使用前將所有試劑恢復到室溫)。 </p><p>  7.2.1萊克多巴胺標準溶液:已備用或根據實際需要按試劑盒說明配置相應濃度的萊克多巴胺標準溶液。</p><p>  7.2.2酶標記物:在凍干粉

12、瓶中精確加入12mL酶標物溶解液,正反搖晃,充分溶解(最好在使用前至少4小時配置)。</p><p>  7.2.3洗滌液:用蒸餾水按1:10(1+9)稀釋</p><p><b>  7.3測試程序</b></p><p>  7.3.1根據所測定樣品及標準數,計算出所需微孔條數,將微孔條插入微孔架,標準和樣品做兩個孔的平行重復,記錄標準和樣

13、品的位置。</p><p>  7.3.2加入50μL的標準品和處理好的樣品到各自的微孔中,標準和樣品做兩個平行重復。</p><p>  7.3.3在所有孔中加入100μL酶標記物,輕輕晃動酶標板。在室溫下(20-25℃)孵育10分鐘。</p><p>  7.3.4倒出孔中的液體,將微孔架倒置在吸水紙上拍干,再加入工作洗液300μL,再倒掉洗液,重復操作3遍以上

14、。最后用吸水紙拍干。</p><p>  7.3.5在所有孔中加入100μL顯色劑,充分混合并在室溫孵育10min。</p><p>  7.3.6在所有孔中加入50μL反應終止液,混合后在450nm處10分鐘內測量吸光度值。</p><p><b>  結果計算</b></p><p>  8.1計算每個標準品和樣品的

15、平均吸光度值。</p><p>  8.2以空白(濃度為0的標準溶液)吸光度值為100%計算,計算出各標準和樣品的相對吸光度值。</p><p>  標準的吸光度值(或樣品)</p><p>  相對吸光度值(%) = ×100 </p><p><b>  空白

16、的吸光度值</b></p><p>  8.3用標準品濃度為橫坐標,450nmi波長的吸光度值為縱坐標在對數坐標紙上繪制標準曲線圖,以待測樣品的相對吸光度值在標準曲線上讀出相應樣品的濃度。</p><p>  啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

17、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊隨著社會和人民生活水平的提高啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

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