酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬腸道微生物發(fā)酵和區(qū)系及機(jī)體免疫功能的影響.pdf

1、蘇南地區(qū)夏季的高溫高濕環(huán)境對生長育肥豬的健康生長是一個很大的挑戰(zhàn)，可能破壞胃腸道內(nèi)正常微生物菌群的代謝平衡，并導(dǎo)致消化吸收和免疫系統(tǒng)出現(xiàn)某些功能性障礙。酵母培養(yǎng)物（Yeast Cultures，簡稱YC）是酵母細(xì)胞、發(fā)酵后培養(yǎng)基和酵母細(xì)胞代謝產(chǎn)物的混合物。YC含有的寡糖類、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、維生素、酵母來源的酶和其他未知生長因子能夠作為腸道正常有益菌的主要底物.因此YC有可能調(diào)節(jié)胃腸道中微生態(tài)平衡，在一定程度上刺激機(jī)體的免疫

2、反應(yīng)。本試驗(yàn)旨在探討YC對夏季生長育肥豬腸道微生物發(fā)酵能力、微生物區(qū)系及相關(guān)免疫功能的影響。試驗(yàn)分為三部分:
　　 一酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬回腸及結(jié)腸微生物發(fā)酵能力的影響
　　 豬腸道微生物發(fā)酵產(chǎn)生的VFA能被腸壁迅速吸收或利用，因此食糜VFA的水平可能不能準(zhǔn)確評價VFA的產(chǎn)量。本試驗(yàn)因此分別設(shè)計(jì)在體動物試驗(yàn)和兩個批次的體外發(fā)酵試驗(yàn)來研究日糧中添加酵母培養(yǎng)物(Yeast Culture，YC)對夏季生長育肥豬腸道微生

3、物發(fā)酵能力的影響.體內(nèi)試驗(yàn)選用180頭、70日齡、平均體重29.56±1.12kg的杜×長×大三元雜交商品豬，隨機(jī)分為3組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10頭豬，對照組（C組）飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1(T1)和試驗(yàn)2(T2)組則在基礎(chǔ)日糧中分別添加1 g/kg· DM和4g/kg·DM的YC。試驗(yàn)期共95天，分生長期(30kg～60kg)和育肥期(60kg～100 kg).分別在生長期末和育肥期末各組各重復(fù)隨機(jī)選取1頭豬進(jìn)行屠宰取樣，

4、采集回腸和結(jié)腸食糜，分別用氣相色譜法和比色法測定食糜的揮發(fā)性脂肪酸（Volatile Fatty Acids，VFA）和乳酸濃度。體外試驗(yàn)中，以上述回腸食糜為底物、結(jié)腸食糜為接種物，來模擬回腸食糜進(jìn)入結(jié)腸后被微生物發(fā)酵產(chǎn)VFA的情況.試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:(1)相同底物（C組回腸食糜）、不同接種物（C、T1、T2組結(jié)腸食糜）組合，以反映YC對結(jié)腸微生物發(fā)酵能力的影響;(2)不同底物（C、T1、T2組回腸食糜）、相同接種物（C組結(jié)腸食糜）組合，以

5、反映YC對回腸食糜可發(fā)酵能力的影響;(3)對應(yīng)底物（C、T1、T2組回腸食糜）和對應(yīng)接種物（C、T1、T2組結(jié)腸食糜），以綜合反映YC對腸道微生物發(fā)酵能力的影響.37℃下發(fā)酵24h后，測定VFA和乳酸濃度。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明:日糧添加YC可在一定程度上改變回腸微生物的發(fā)酵產(chǎn)物組成，生長期T2組回腸食糜丙酸濃度顯著高于T1組(P＜0.05)，T2組丁酸濃度顯著低于對照組(P＜0.05)，T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對照組（P＜0.05），

6、T2組回腸食糜的乳酸濃度極顯著低于對照組(P＜0.01);育肥期T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對照組(P＜0.05)。YC對結(jié)腸食糜乳酸和VFA濃度沒有影響。體外發(fā)酵試驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn):①YC有提高結(jié)腸微生物發(fā)酵回腸食糜產(chǎn)VFA能力的趨勢，生長期C-T1組產(chǎn)生的丁酸濃度顯著高于C-C組(P＜0.05);育肥期試驗(yàn)組結(jié)腸微生物的發(fā)酵能力與對照組相比有升高趨勢，但差異不顯著(P＞0.05)。②YC顯著提高了回腸食糜的可發(fā)酵性，生長期T1-C組T

7、VFA濃度及其各組分均顯著高于C-C組（P＜0.01）;T2-C組乙酸、丁酸和總VFA濃度均顯著高于C-C組(P＜0.01);育肥期T1-C和T2-C組TVFA、乙、丙和丁酸濃度較對照組有升高趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）.③從整體看YC顯著提高了生長期腸道微生物產(chǎn)丁酸的能力（P＜0.01），但對生長期TVFA和乙、丙酸濃度，及育肥期TVFA和各組成酸的濃度無顯著影響(P＞0.05)。綜合以上試驗(yàn)結(jié)果:在夏季生長育肥豬日糧中添加YC

8、能顯著降低回腸乳酸濃度;同時顯著增強(qiáng)腸道微生物發(fā)酵產(chǎn)VFA的能力，尤其是產(chǎn)生丁酸的能力，從而有助于緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 二酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬回腸及結(jié)腸微生物區(qū)系的影響
　　 本試驗(yàn)以研究酵母培養(yǎng)物(YC)對夏季生長育肥豬腸道微生物區(qū)系結(jié)構(gòu)和優(yōu)勢菌數(shù)量的影響為目的。試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組、動物屠宰和回、結(jié)腸食糜樣品采集同試驗(yàn)一的在體試驗(yàn)。利用基于16S rRNA基因的PCR/DGGE技術(shù)探討回

9、、結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)的變化，Real-time PCR技術(shù)測定回、結(jié)腸食糜總菌和乳酸桿菌數(shù)量，半定量PCR測定結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌的數(shù)量。結(jié)果表明，YC一定程度上改變了回、結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)，添加YC組菌群相似性更高。YC對生長育肥豬回、結(jié)腸食糜總菌數(shù)量沒有影響，試驗(yàn)組生長育肥豬回腸食糜中乳酸桿菌的數(shù)量較對照組顯著降低(P＜0.05)，而各組結(jié)腸食糜乳酸桿菌數(shù)量沒有顯著差異。YC提高了結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌的數(shù)量，但差異不顯著(P＞0.05)。由此可見，夏季生長

10、育肥豬日糧中添加YC，能夠提高回腸和結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)相似性，顯著降低回腸乳酸桿菌的數(shù)量，在一定程度上提高結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌數(shù)量，與體外發(fā)酵試驗(yàn)中YC降低回腸乳酸濃度，提高丁酸濃度的結(jié)果相一致，因而有利于菌群結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，以緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 三酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬機(jī)體免疫功能的影響
　　 本試驗(yàn)旨在探討夏季日糧中添加酵母培養(yǎng)物對生長育肥豬免疫機(jī)能相關(guān)指標(biāo)的影響。試驗(yàn)動物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)同試驗(yàn)一。生長

11、和育肥期末，從每欄中分別隨機(jī)選取一頭豬屠宰，稱胸腺、脾臟和肝臟重量，計(jì)算免疫器官指數(shù);采血并分離血清，用于測定IL-4、IFN-γ和PRRS抗體滴度;采集空腸組織和脾臟，勻漿后分別用于測定空腸SIgA、IL-4和IFN-γ濃度，及脾臟的IL-4和IFN-γ濃度。結(jié)果表明，生長期T2組空腸IFN-γ濃度較T1組顯著降低（P＜0.05）;T1組和T2組血清IFN-γ濃度均極顯著高于對照組(P＜0.01);T2組空腸IL-4濃度較對照組有降低

12、趨勢(P=0.07); T2組脾臟IL-4濃度顯著低于對照組（P＜0.05）;T1組和T2組血清IL-4濃度較對照組有升高趨勢（P=0.05）。育肥期T2組肝臟指數(shù)較比對照組顯著降低（P＜0.05）;T1組脾臟IFN-γ濃度顯著低于對照組(P＜0.05），T2組極顯著低于對照組(P＜0.01);T1組和T2組血清IL-4濃度均顯著高于對照組(P＜0.05)。以上結(jié)果表明，夏季生長育肥豬日糧中添加YC，在一定程度上增強(qiáng)了機(jī)體體液免疫和細(xì)胞