山藥多糖對大鼠盲腸微生物區(qū)系和免疫功能的影響.pdf

1、試驗一：選擇山藥多糖(ChineseYamPolysaccharide，CYP)作為研究對象。采用水煎分段醇沉法，當乙醇終濃度分別為30％、45％、60％和75％時沉淀得到4種山藥多糖，期間采用三氯乙酸法去除多糖中蛋白質。用硫酸蒽酮法測得其總多糖含量分別為45.85％、56.24％、90.91％和13.87％。并通過考馬斯亮藍比色法測得4種山藥多糖蛋白質含量分別為2.62％、2.71％、2.81％和2.53％。為整個試驗提供試驗材料。

2、 試驗二：本試驗采用體外發(fā)酵技術評價分段醇沉得到的4個山藥多糖對SD大鼠盲腸食糜的體外發(fā)酵特性和發(fā)酵產物的影響，并探討其用做動物功能性營養(yǎng)調控劑的可行性。選用正常飼Ⅱ畏的SD大鼠，處死后無菌取盲腸食糜作為接種物，分別以試驗一所提取的4種山藥多糖和葡萄糖為底物進行體外發(fā)酵。于不同發(fā)酵時間點記錄產氣量，36h后檢測發(fā)酵液pH值、NH3和SCFA含量，并提取發(fā)酵液中細菌DNA用以DGGE。結果表明，60％醇沉多糖發(fā)酵動力學參數最優(yōu)，并顯

3、著高于其它多糖及培養(yǎng)液對照組(p<0.05)；45％、60％和75％醇沉多糖組的pH值和NH3含量均極顯著低于培養(yǎng)液對照組(p<0.01)；60％醇沉多糖組的乙酸和丁酸含量均顯著高于其它處理組(p<0.05)，丙酸和異丁酸含量稍低于75％醇沉多糖組，但差異不顯著。乙酸、丙酸和丁酸含量與pH值和NH3含量具有顯著的相關性(p<0.05)。通過DGGE，發(fā)現60％醇沉多糖組和75％醇沉多糖組具有很高的相似性(91％)，且能較有效的提高特定菌

4、種含量并減少微生物的種類和種群數量方面均顯著優(yōu)于30％、45％醇沉多糖。提示60％和75％醇沉山藥多糖是2種理想的可被SD大鼠盲腸微生物利用的碳源，并可改變盲腸微生態(tài)區(qū)系及其產生的SCFA含量與組成。 試驗三：本試驗旨在研究山藥多糖對生長性能和免疫功能的影響。試驗以40只平均體重為(87±3)g的SD雄性大鼠為研究對象，隨機分為4組：對照組(Ⅰ)，飼喂基礎日糧；處理組(Ⅱ組、Ⅲ組和IV組)，分別在基礎日糧中添加0.25g/kg、

5、0.5g/kg和1.0g/kg60％醇沉山藥多糖。每組10個重復，每個重復1只SD大鼠。預試期7d，試驗期21d。試驗結果表明：(1)兩個試驗期內0.25g/kg山藥多糖添加組在提高SD大鼠日增重方面顯著高于對照組(p<0.05)，試驗第三周在降低料重比方面顯著高于對照組(p<0.05)，且隨著多糖添加量的提高，SD大鼠生長性能逐漸下降；(2)兩個試驗期內1～g/kg山藥多糖添加組的血清IL-2和TNF-α水平均顯著高于對照組(p<0.

6、05)，LDL、TC和TG水平均顯著低于對照組(p<0.05)。隨著多糖添加量的提高，血清IL-2和TNF-α水平均逐漸升高，LDL、TC和TG水平逐漸下降。(3)兩個試驗期內0.25g/kg山藥多糖添加組的OD值顯著高于對照組(p<0.05)，隨著多糖添加量的提高，OD值逐漸下降；(4)試驗第一周0.25g/kg和0.5g/kg山藥多糖添加組盲腸食糜中乙酸和丁酸含量顯著高于對照組和1.0g/kg山藥多糖添加組(p<0.05)，0.25

7、g/kg山藥多糖添加組丙酸含量顯著高于其它試驗組(p<0.05)。試驗第三周0.25g/kg山藥多糖添加組乙酸含量顯著高于其它試驗組(p<0.05)；(4)通過DGGE，發(fā)現山藥多糖添加組中代表唾液乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌的條帶亮度高于對照組，且隨著試驗期的延長，各山藥多糖添加組的優(yōu)勢菌群數量增加(吸收度增強)，處理間各重復相似性有所提高。提示0.25g/kg山藥多糖添加組可提高SD大鼠生長性能和免疫功能，并可被SD大鼠盲腸微生物利用，改