氟苯尼考在西伯利亞鱘的體內(nèi)外藥效學(xué)及藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、近年來，隨著鱘魚養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展，病害日益嚴(yán)重，氟苯尼考作為新型動(dòng)物專用氯霉素類廣譜抗菌藥，廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。氟苯尼考胺是氟苯尼考的主要活性代謝產(chǎn)物，在水產(chǎn)品中歐盟和中國均以氟苯尼考和氟苯尼考胺共同作為檢出物。本論文旨在通過綜合評價(jià)氟苯尼考的藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)，為該藥在西伯利亞鱘養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 采用試管二倍稀釋法測定了氟苯尼考對魯氏耶爾森氏菌的最小抑菌濃度(Minimalinhibitory concen

2、tration，MIC)、最小殺菌濃度(Minimal bactericidal concentration，MBC)、生長曲線、殺菌動(dòng)力學(xué)曲線以及四種培養(yǎng)因子(細(xì)菌接種量、鎂離子、小牛血清和培養(yǎng)基pH值)對氟苯尼考抗菌效果的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明：氟苯尼考對魯氏耶爾森氏菌的MIC、MBC和MBC/MIC分別為0.5μg/mL、1.0μg/mL和2，說明氟苯尼考對魯氏耶爾森氏菌有較好的抑菌和殺菌效果；魯氏耶爾森氏菌在蛋白胨培養(yǎng)基中培養(yǎng)1h以

3、后開始進(jìn)入對數(shù)生長期，約持續(xù)7h，8h時(shí)細(xì)菌濃度達(dá)108CFU/mL以上，8h后生長速度減慢，12h時(shí)細(xì)菌數(shù)趨于恒定；氟苯尼考1MIC、2MIC、4MIC和8MIC組對魯氏耶爾森氏菌的殺菌曲線，由上向下依次排列，表現(xiàn)出強(qiáng)濃度依賴性，即殺菌速率8MIC>4MIC>2MIC>1MIC；氟苯尼考對魯氏耶爾森氏菌的體外PAE值呈濃度依賴性，當(dāng)藥物濃度從2MIC增加到8MIC時(shí)，PAE分別為3.71±0.11h、4.54±0.27h、5.52±0

4、.23h；氟苯尼考對魯氏耶爾森氏菌的體外抑菌效果受pH值、細(xì)菌接種量和血清體積分?jǐn)?shù)等培養(yǎng)條件的影響較明顯。
　　 對西伯利亞鱘感染魯氏耶爾森氏菌的疾病模型進(jìn)行復(fù)制后，在感染24h時(shí)，進(jìn)行氟苯尼考體內(nèi)藥效學(xué)試驗(yàn)，各試驗(yàn)組分別進(jìn)行治療試驗(yàn)，每日給藥1次，連續(xù)給藥3d。試驗(yàn)結(jié)果顯示：氟苯尼考高(50mg/Kg)、中(20 mg/Kg)、低(5 mg/Kg)三個(gè)劑量組均能降低西伯利亞鱘感染魯氏耶爾森氏菌后的死亡率，且中、高劑量組的有效率

5、可達(dá)100％，表明魯氏耶爾森氏菌對氟苯尼考高度敏感，與體外藥效試驗(yàn)結(jié)果一致。
　　 建立了西伯利亞鱘血漿、肌肉、肝臟、腎臟中氟苯尼考及氟苯尼考胺的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分析方法，樣品采用堿性乙酸乙酯提取，正己烷脫脂，濃縮后過ACQUIT UPLC BEH-C18色譜柱分離，乙腈和水為流動(dòng)相梯度洗脫，多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)。結(jié)果顯示：氟苯尼考和氟苯尼考胺在10～1000ng/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，線性回歸相關(guān)

6、性良好，相關(guān)系數(shù)為0.999；最低檢測限分別為0.1ng/mL和0.5ng/mL；平均回收率分別為85%～110%、80%～98%；日內(nèi)和日間平均變異系數(shù)均在15%以內(nèi)，為氟苯尼考及氟苯尼考胺的藥代動(dòng)力學(xué)研究提供了可靠的分析方法。
　　 在水溫22℃條件下，氟苯尼考以15mg/kg單次口灌西伯利亞鱘后，測定血漿、肝臟、腎臟和肌肉中氟苯尼考及其代謝產(chǎn)物氟苯尼考胺的濃度，所得數(shù)據(jù)顯示：氟苯尼考及其代謝產(chǎn)物氟苯尼考胺在西伯利亞鱘體內(nèi)的

7、藥時(shí)數(shù)據(jù)均符合一級吸收二室開放模型，血藥濃度和時(shí)間方程為：CFF=4.154e-0.131t+1.142 e-0.022t-5.296e-0.806t和CFFA=0.236e-0.084t+0.108e-0.008t-0.344e-0.278t，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)最大血藥濃度(Cmax)為3.400μg/mL，達(dá)峰時(shí)間(Tpeak)為2.943h，表觀分布容積(V/F)為3.267L/kg，消除半衰期(t1/2β)為31.210h，Cmax

8、(FFA)/Cmax(FF)和AUCFFA/AUCFF為5.44%和20.73%；氟苯尼考和氟苯尼考胺在各組織中的分布規(guī)律相似，均先在肝腎中富集，氟苯尼考在組織中的含量由高到低依次為：肝臟、腎臟、肌肉，氟苯尼考胺的含量由高到低依次為：腎臟、肝臟、肌肉；氟苯尼考和氟苯尼考胺均在腎臟中消除最為緩慢且氟苯尼考胺的消除速度明顯慢于氟苯尼考。綜上所述：氟苯尼考在西伯利亞鱘體內(nèi)具有吸收迅速、達(dá)峰濃度高、消除相對緩慢及組織中廣泛分布的特征，且在西伯利