茶樹組織培養(yǎng)再生體系優(yōu)化及遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、茶(Camellia sinensis L.)為山茶科山茶屬多年生常綠喬木或灌木，具有悠久的栽培歷史，是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。常規(guī)茶樹育種技術(shù)具有局限性，如遠(yuǎn)緣雜交困難、有益突變頻率低、選育優(yōu)良品種耗時長、花期不遇等，制約了茶樹優(yōu)質(zhì)資源的利用，使得茶樹品種選育工作難以取得突破性的進(jìn)展。本研究以茶樹未成熟胚為對象，優(yōu)化了茶樹組織培養(yǎng)再生體系，并在此基礎(chǔ)上探索根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)茶樹遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，為利用基因工程技術(shù)對茶樹進(jìn)行遺傳改良打下基礎(chǔ)。主

2、要研究結(jié)果如下:
　　 1.茶樹植株組培再生體系優(yōu)化
　　 本論文以茶樹未成熟胚為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)，對各階段影響再生效率的諸因素進(jìn)行研究，選出了各階段適宜外植體生長的最佳培養(yǎng)基和激素組合，優(yōu)化了茶樹組織培養(yǎng)再生體系。研究結(jié)果表明，未成熟胚以胚向上的方式接種，誘導(dǎo)效果較好;當(dāng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ER+0.1 mg/L NAA+1 mg/L6-BA+1 mg/L GA3時，茶樹愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為98.9％;分化培養(yǎng)基為ER+0

3、.1 mg/L IBA十2 mg/L6-BA時，分化率最高可達(dá)87.5％;組培苗在壯苗培養(yǎng)基ER+0.1 mg/L NAA+2 mg/L6-BA+1 mg/L GA3中長勢最好;最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.2 mg/L IBA+1 mg/L KT。
　　 2.農(nóng)桿菌介導(dǎo)茶樹遺傳轉(zhuǎn)化體系建立
　　 以帶未成熟胚的子葉和純子葉為轉(zhuǎn)化受體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化體系研究，探討了遺傳轉(zhuǎn)化過程中侵染時間、共培養(yǎng)時間、共培養(yǎng)基、AS濃度和