大豆、榨菜的組織培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文研究了大豆的離體再生和根部農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化及榨菜的離體培養(yǎng).大豆子葉、下胚軸培養(yǎng)在不同激素的B<,5>培養(yǎng)基中,只能誘導(dǎo)出愈傷組織,難分化芽.但子葉節(jié)卻能誘導(dǎo)出叢生芽,在2mg/L BA+0.2mg/L IBA的B<,5>培養(yǎng)基上再生頻率達41.9﹪.以榨菜子葉、真葉為外植體進行離體培養(yǎng),用BA、CPPU、TDZ和KT等細胞分裂素和生長素NAA、IBA組合誘導(dǎo)子葉、真葉再生不定芽試驗.通過從重組質(zhì)粒pBI121上切下S基因(連

2、同35S啟動子)片段,將該片段定向克隆到Pcambia1305.1質(zhì)粒的多克隆位點HindⅢ、BamHⅠ之間,構(gòu)建了一種植物表達載體.經(jīng)雙酶切鑒定證實S基因克隆到載體pCAMBIA1305.1上.用三親交配法將重組克隆導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌EHA105,獲得了含Pcambia1305.1重組質(zhì)粒的EHA105根癌農(nóng)桿菌菌株.通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)對傳染性支氣管炎病毒纖突蛋白S基因在大豆中的遺傳轉(zhuǎn)化進行了研究.以子葉節(jié)為外植體,在抗性篩選培養(yǎng)基上大多

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