谷子愈傷誘導優(yōu)化及轉化影響因素分析.pdf

1、谷子(SetaritalicaL)起源于中國,是世界上最古老的農作物之一,具有抗逆性強、適用性廣、營養(yǎng)豐富等特點在我國的北方糧食生產中占有重要的地位。谷子是二倍體自花授粉作物,其基因組小(約470Mb)而且非常穩(wěn)定,非常適合作為基因組研究對象。但是谷子是區(qū)域性重要作物,多在發(fā)展國家和欠發(fā)達國家種植,研究經費投入少,造成谷子基因組和生物技術方面的研究相對滯后于其它主要作物。隨著世界人口的不斷增長,對糧食的需求量也相應增加,這就需要通過基因

2、工程技術,利用優(yōu)質、高產等基因資源來提高谷子的品質和產量。而建立一套高效、優(yōu)良的谷子轉化和再生體系是基因工程方法選育、改良谷子品種、提高產量的前提。
　　 本試驗采用谷子幼穗和不同谷子品種莖尖作為外植體進行愈傷誘導,分析了影響莖尖愈傷形成的因素并對誘導條件進行優(yōu)化。在幼穗的愈傷誘導中,形成的愈傷組織質地緊密且成白色顆粒狀結構,但在分化培養(yǎng)基中愈傷形成的綠芽沒有進一步的生長和分化,未獲得再生植株。莖尖作為外植體進行愈傷誘導中,將不

3、同品種的谷子分別轉移到三種2,4-D濃度的誘導培養(yǎng)基上,結果表明2,4-D的濃度對谷子愈傷形成有著重要影響,且不同品種的谷子對2,4-D的敏感度不同。試驗分析了Zn和Kn兩種細胞分裂素對谷子莖尖愈傷形成的影響,結果證明:Kn比Zn較為適合谷子的愈傷形成。糖類作為培養(yǎng)基的基本碳源,對莖尖愈傷的形成也有一定影響,數(shù)據顯示蔗糖相較于葡萄糖更為適合谷子愈傷的形成。此外實驗對谷子的初級愈傷和胚型愈傷進行了農桿菌轉化,并進行GUS染色分析,試驗結果