菊薯愈傷組織誘導(dǎo)及再分化初步研究.pdf

1、選擇菊薯優(yōu)良株系為試驗(yàn)材料，以嫩葉、腋芽、冠芽等為外植體，分別對(duì)消毒程序、篩選方法、愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽分化誘導(dǎo)、繼代增殖培養(yǎng)、生根誘導(dǎo)培養(yǎng)等離體快繁過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行了初步研究。 外植體消毒試驗(yàn)結(jié)果表明：不同外植體對(duì)0．1％HgCl2溶液的敏感性存在著一定的差異，但均達(dá)到較好的消毒效果。其消毒程序?yàn)椋毫魉疀_洗2～3h后，用濃度70％～75％酒精表面消毒10～15s后，無(wú)菌水沖洗2～3次，再用0．1％HgCl2消毒8min，無(wú)

2、菌水沖洗3～5次。 在外植體篩選和愈傷組織誘導(dǎo)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，適合無(wú)菌苗培養(yǎng)的外植體材料有葉片、腋芽、莖節(jié)組織和塊莖冠芽等。 研究發(fā)現(xiàn)菊薯離體培養(yǎng)分化成苗至少有三種途徑：即無(wú)菌短枝型、器官發(fā)生型、器官直接轉(zhuǎn)變型。 研究結(jié)果表明，適合菊薯外植體材料誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基是：MS+6-BA1～1．5 mg·L-1+NAA0．5～1．0 mg·L-1+3％蔗糖+0．7％瓊脂，pH值5．8。最適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間為：7～10

3、d。。 不定芽分化誘導(dǎo)的研究結(jié)果表明，來(lái)源不同的愈傷組織對(duì)不同激素和配比所表現(xiàn)出的分化誘導(dǎo)效應(yīng)不同，進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基是：MS+6-BA1．0 mg·L-1+NAA0．1mg·L-1+3％蔗糖+0．7％瓊脂，pH值5．8，誘導(dǎo)分化率達(dá)79．28％．最適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間為60～80d。 在繼代增殖培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)：菊薯愈傷組織在繼代培養(yǎng)時(shí)極易發(fā)生褐化而死亡； 6-BA、NAA、GA3對(duì)菊薯不定芽繼代增殖影響的主次順

4、序是6-BA、GA3和NAA；對(duì)不定芽生長(zhǎng)影響的主次順序是GA3、6-BA、NAA；不定芽繼代增殖效果最佳的培養(yǎng)基為：MS+6-BA1．0mg·L-1+NAA0．01 mg·L-1+GA30．1mg·L-1，增殖率為567％。 生根誘導(dǎo)試驗(yàn)結(jié)果表明：菊薯試管苗具有極易生根的特性。大量元素對(duì)生根率具有一定的影響，以1/2MS+NAA0．01 mg·L-1作為生根培養(yǎng)基最適宜，生根率達(dá)到88．89％。不同濃度的為NAA對(duì)生根誘導(dǎo)率影