海星皂甙的分離純化及其對果蠅生長發(fā)育的影響.pdf

1、海星因為以海參、鮑魚等海洋珍貴軟體動物為食一直以來被視為影響海洋養(yǎng)殖業(yè)的有害動物，近些年來，國內(nèi)外關(guān)于海星中活性成分的提取及其活性研究越來越多，尤其是海星皂甙的研究，但是關(guān)于其抑制昆蟲生長發(fā)育的研究一直以來都是個空白。我國沿海的海星資源豐富，但一直以來的研究都無法使海星被人們大批量的利用，研究一種海星的生物活性使其可以大量的被開發(fā)利用應(yīng)該引起人們更多的關(guān)注。本文主要研究了以下幾個方面。
　　首先，將整體凍干的羅氏海盤車粉碎機粉碎后

2、用改進的甲醇提取法進行浸提，先用甲醇浸提，再用水飽和的正丁醇進行提取，最終得到海星總皂甙，利用香草醛-硫酸檢測法及其溶血活性對提取出的總皂甙進行初步鑒定。然后用甲醇復(fù)溶提取物后中壓柱層析分離，最終得到了10個組分，其中F-2所得到的峰面積最大，對這十個組分進行高效液相色譜的分析，F(xiàn)-2組分的峰型最好，對F-2進行進一步分離純化后得到較純的一種化合物F-2B。
　　其次，對化合物F-2利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法進行結(jié)構(gòu)解析。<

3、br>　　最后，對提取出的海星皂甙的活性進行研究。研究海星皂甙對果蠅生長發(fā)育的影響。用提取出的100μg/mL、50μg/mL、20μg/mL、10μg/mL的海星皂甙溶液以及對照組、100μg/mL的毛地黃皂甙溶液組、DMSO組配制果蠅培養(yǎng)基對同種條件果蠅進行飼養(yǎng)，研究其子代果蠅的蛹化和羽化情況。實驗證明，與對照組相比，海星皂甙對果蠅子代的蛹化和羽化都有一定的抑制作用，其抑制活性隨培養(yǎng)基中皂甙的濃度增加而增大，而DMSO組則沒有抑制活

4、性。其中100μg/ml在第七天的蛹化最大抑制率為48.9％，在第九天的羽化抑制率為68.75％，顯示出比較高的抑制活性，而毛地黃皂甙的第七天蛹化抑制率為21.2％，第九天羽化抑制率為31.25％。
　　另外，利用MTT法檢測500μg/mL、350μg/mL、250μg/mL、125μg/mL的海星總皂甙和毛地黃皂甙標(biāo)準(zhǔn)品對HepG2肝癌細(xì)胞的增殖抑制作用，結(jié)果表明，海星總皂甙和毛地黃皂甙對細(xì)胞都有比較高的抑制活性，并且隨著標(biāo)準(zhǔn)

5、品和樣品濃度的增加，其抑制活性也增加，在終濃度500μg/mL濃度下對細(xì)胞有較大的抑制能力，抑制率分別為:49.89％和60.48％，而絲裂霉素的抑制率為63.55％。
　　本論文中提取出的海星總皂甙對果蠅的蛹化和羽化都有比較高的抑制活性，若在此基礎(chǔ)上，進一步研究其抑制機理，并對其化學(xué)及其生理上進行研究，有望開發(fā)出一種新型的生物活性物質(zhì)，可作為一種潛在的天然昆蟲殺蟲劑，同時，根據(jù)近些年的研究成果，亦可能開發(fā)成為一種新型的天然藥物。