南瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)體系的優(yōu)化.pdf

1、南瓜又名倭瓜,藥用保健功效以及觀賞價(jià)值高,具有“世界性蔬菜”的美稱。我國(guó)南瓜的優(yōu)良品種類型少,更新?lián)Q代非常慢,相關(guān)的育種理論基礎(chǔ)嚴(yán)重滯后。為了加快南瓜育種進(jìn)程,探討南瓜未受精胚珠誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)條件,本試驗(yàn)以‘試驗(yàn)?zāi)瞎?號(hào)’為材料,以MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g.L-1)+2,4-D(1.00mg·L-1)斗NAA(0.25mg·L-1)+6-BA(0.50mg·L-1)為基本培養(yǎng)基,在此培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,研究KT預(yù)

2、處理和AgNO3刺激對(duì)未受精胚珠誘導(dǎo)的影響。同時(shí)運(yùn)用石蠟切片技術(shù)觀察四個(gè)重要時(shí)期胚囊的發(fā)育狀態(tài)并以改良苯酚品紅壓片法觀察根尖染色體,以期為南瓜單倍體的培養(yǎng)和鑒定提供一定的理論支撐。本試驗(yàn)的研究結(jié)果如下:
　　 1.南瓜未受精胚珠胚狀體的誘導(dǎo)以組合MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)+2,4-D(1.00mg·L-1)+NAA(0.25mg·L-1)+6-BA(0.50mg·L-1)為宜,胚狀體誘導(dǎo)率為3

3、.3％。而此后的分化再生培養(yǎng)基則以MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)和MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)+活性炭(1.00g·L-1)為佳。
　　 2.試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不定芽也能發(fā)育成正常植株,但比率很低,只有0.3％～6.7％,而胚狀體發(fā)育成正常植株的比率高達(dá)70％以上。
　　 3.AgNO3刺激對(duì)南瓜未受精胚珠不定芽的分化具有促進(jìn)作用,最佳濃度為16mg·L-1。KT預(yù)

4、處理對(duì)南瓜未受精胚珠的不定芽的發(fā)生具有抑制作用,這種抑制作用在開花當(dāng)天的未受精胚珠上最為明顯,使其出芽率從50％降到了3.3％,對(duì)其他兩個(gè)接種時(shí)期未受精胚珠的抑制作用稍減。另外KT預(yù)處理和AgNO3刺激均對(duì)未受精胚珠胚狀體和小苗的誘導(dǎo)具有抑制作用。
　　 4.開花前三天的子房處于單核胚囊時(shí)期；開花前兩天的子房處于雙核胚囊時(shí)期；開花前一天的子房處于四核胚囊時(shí)期；開花當(dāng)天的子房處于七細(xì)胞八核的成熟胚囊期,其胚囊為蓼型胚囊。處于成熟胚