大蒜未受精子房離體培養(yǎng)的研究.pdf

1、試驗選取六個不同基因型的大蒜品種，分別進(jìn)行大蒜花器官的培養(yǎng)，獲得發(fā)育良好的大蒜子房。以大蒜未受精子房為試材，在適宜的培養(yǎng)條件下完成了愈傷組織的誘導(dǎo)及分化，獲得了再生植株，建立了大蒜單倍體植株再生體系。此外還研究了大蒜未受精子房誘導(dǎo)愈傷組織的影響因素，進(jìn)一步優(yōu)化了大蒜子房培養(yǎng)技術(shù)體系。結(jié)果表明:
　　 1、大蒜子房愈傷組織誘導(dǎo)及分化需要適宜的培養(yǎng)基條件。以‘糙蒜'品種的未受精子房為試材進(jìn)行離體培養(yǎng)，B5培養(yǎng)基及MS培養(yǎng)基上均能形成

2、愈傷組織，B5培養(yǎng)基效果優(yōu)于MS培養(yǎng)基;N6培養(yǎng)基不能誘導(dǎo)形成愈傷組織，不宜用于大蒜子房愈傷組織的誘導(dǎo)。誘導(dǎo)大蒜子房愈傷組織的適宜激素組合為2mg·L-16-BA+1mg·L-1 NAA，愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)11.11％。在B5培養(yǎng)基上添加3mg·L-16-BA+1mg·L-1 NAA，不定芽的分化頻率最高，可達(dá)46.15％。誘導(dǎo)生根的最佳培養(yǎng)基為B5+0.05mg·L-1 NAA。
　　 2、低溫預(yù)處理和短期熱激處理均可提高大蒜

3、子房愈傷組織的誘導(dǎo)率。以‘糙蒜'和‘正月早'開花前1～2d的未受精子房為試材，進(jìn)行分別0(CK)、1、2、4、6d的4℃低溫預(yù)處理和35℃0(CK)、12、24、36、48h的熱激處理，發(fā)現(xiàn)4℃低溫處理4d可明顯提高愈傷組織的誘導(dǎo)率，35℃處理48h可顯著提高誘導(dǎo)率。但經(jīng)過熱激處理的子房不論處理時間長短，褐化均較為嚴(yán)重，褐化率都在60％以上，不宜采用。
　　 3、基因型不同，子房愈傷組織的誘導(dǎo)情況不同。分別以‘糙蒜'、‘二水早'

4、、‘蒲棵'、‘正月早'、‘紅七星'六個不同品種的開花前1～2d的大蒜未受精子房為試材，發(fā)現(xiàn)糙蒜品種的子房愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為11.11％;其次為‘正月早'、‘蒲棵'、‘紅七星'、‘二季早'，‘二水早'的子房愈傷組織誘導(dǎo)率最低為0。
　　 4、子房發(fā)育程度對愈傷組織誘導(dǎo)有一定的影響。以‘糙蒜'、‘蒲棵'、‘正月早'三個品種的子房為試材，分別對開花當(dāng)天、開花前2～3d、開花前6～7d的大蒜子房進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)三個品種均以開花當(dāng)天的子