綠色木霉T25及其對番茄灰霉病生防機制研究.pdf

1、本研究采用稀釋平板法、病原菌誘捕法從溫室土壤中的10份土樣中分離到59個木霉菌株。獲得了具有明顯生防潛能的哈茨木霉T25菌株。該菌株具有拮抗譜廣、拮抗作用強、生長速度快、產(chǎn)孢量大，盆栽防病效果好等特點。 通過形態(tài)學(xué)觀察鑒定木霉菌T25為綠色木霉Trichoderma atroviride。通過rDNA-ITS1序列分析，T25的rDNA-ITS1序列片段與genebank數(shù)據(jù)庫中所有序列片段比較，發(fā)現(xiàn)T25的rDNA-ITS1序

2、列與T. atroviride的序列同源性最高(98％)，與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。 研究發(fā)現(xiàn)T25菌株生長迅速在PDA培養(yǎng)基上生長最好。溫度對T25菌株菌絲生長和孢子產(chǎn)生影響顯著，30℃時菌絲生長最快，25℃時產(chǎn)孢量最大。T25在pH值2～10范圍內(nèi)均可生長，pH值5～6時生長最快，pH值為6時孢子產(chǎn)生量最大。光照處理對茵絲生長影響顯著，并且明顯促進孢子產(chǎn)生。淀粉、蔗糖分別為菌絲生長和產(chǎn)孢的最佳碳源。硫酸銨和蛋白胨為菌絲生長和產(chǎn)孢

3、的最佳氮源。不同維生素對菌絲生長和孢子產(chǎn)生的作用不同，VB<,1>+VH、VB<,6>對菌絲生長和產(chǎn)孢最有利。微量元素對菌絲生長有一定的促進作用，Ca<'2+>有利于孢子的產(chǎn)生。在PDA膜上，T25菌株的孢子從8h以后開始萌發(fā)，16h萌發(fā)率達到100％。 在T25與 Botrytis cinerea strain Bo-Ci 的對峙培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)木霉菌生長快于Botrytis cinerea，兩種菌接觸后Bo-Ci生長停止。隨后

4、，木霉菌繼續(xù)生長，覆蓋灰霉菌的菌落并大量產(chǎn)孢。顯微觀察發(fā)現(xiàn)T25菌絲首先向Bo-Ci趨性生長，然后緊貼灰霉菌菌絲平行生長或穿入菌絲生長，最后灰霉菌菌絲瓦解。 對T25的抗生作用試驗表明離體條件下T25菌株的抗生作用不大。發(fā)酵原液對Bo-Ci菌絲生長和孢子萌發(fā)均無抑制作用，但T25的揮發(fā)性物質(zhì)對病菌孢子萌發(fā)具有一定的抑制作用，盡管抑制率還不到10％。含有T25分泌物的培養(yǎng)基對病菌孢子萌發(fā)有很強的抑制作用，抑制率高達75.06％。