中國荷斯坦牛DGAT1多態(tài)性檢測技術(shù)建立及與產(chǎn)奶性狀關(guān)聯(lián)分析.pdf

1、甘油二酯?；D(zhuǎn)移酶(DGAT1)是控制甘油三脂合成的關(guān)鍵酶。研究發(fā)現(xiàn)奶牛DGAT1基因外顯子8中發(fā)生了一個由AA到GC的雙核苷酸非保守替換突變，其導(dǎo)致DGAT1第232位的賴氨酸變?yōu)楸彼?，從而?dǎo)致了一個K232A位點的多態(tài)性，進一步研究表明該位點對荷斯坦牛產(chǎn)奶性狀尤其是乳脂量有顯著影響。因此，DGAT1基因是產(chǎn)奶性狀的一個重要候選功能基因。 本研究根據(jù)DGAT1基因外顯子8的AA/GC突變導(dǎo)致CfrI限制性酶切位點出現(xiàn)的原理，

2、針對AA/GC突變位點設(shè)計了一對引物，特異性擴增奶牛DGAT1基因含有上述點突變的片段，建立了一種準(zhǔn)確判定奶牛DGAT1基因型的.PCR-RFLP方法。PCR擴增產(chǎn)物長度為201bp，經(jīng)限制性內(nèi)切酶CfrI酶切后，結(jié)果出現(xiàn)三種基因型：201bp：201bp，178bp，23bp和178bp，23bp，分別命名為KK、KA和AA。 應(yīng)用該PCR-RFLP方法對北京郊區(qū)14個奶牛場的1222頭中國荷斯坦牛的DGAT1基因進行了基因型

3、檢測分析，發(fā)現(xiàn)KK、KA和AA三種基因型的頻率分別為0.1432、0.6097和0.2471；采用動物模型對數(shù)據(jù)進行擬合，通過SAS(8.2)MIXED過程對奶牛產(chǎn)奶性狀和DGAT1基因型進行關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明：不同基因型之間的305天產(chǎn)奶量、乳脂量、乳蛋白量差異顯著(P<0.01)，AA基因型產(chǎn)奶量高于KA基因型(P<0.01)，KA基因型產(chǎn)奶量高于KK型(P<0.01)；KK基因型乳脂量高于KA基因型(P<0.01)，KA基因型高于