產(chǎn)大環(huán)內(nèi)酯化合物的紅樹林放線菌的篩選、產(chǎn)物分離鑒定及活性研究.pdf

1、放線菌是目前發(fā)現(xiàn)抗生素最多的微生物類群,海洋放線菌是海洋微生物研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。
　　 在眾多微生物代謝產(chǎn)物中,大環(huán)內(nèi)酯化合物已被證明具有廣泛的抗細(xì)菌和抗真菌作用,而結(jié)構(gòu)介于現(xiàn)有抗菌藥物之間的含有2～3個(gè)共軛雙鍵的大環(huán)內(nèi)酯化合物,則呈現(xiàn)出更多的生物活性,如抗菌、抗寄生蟲、抗腫瘤或免疫調(diào)節(jié)等。
　　 為從海洋放線菌中發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎、活性特異的含有2～3個(gè)共軛雙鍵的大環(huán)內(nèi)酯類化合物,本研究利用高效液相色譜、薄層色譜、紫外光譜和

2、紅外光譜等技術(shù)手段,建立了大環(huán)內(nèi)酯化合物產(chǎn)生菌的化學(xué)篩選方法,對來源于海南島紅樹林288株放線菌進(jìn)行了有效的篩選,最后選定菌株211726作為該課題的研究對象。分類學(xué)研究表明該菌株屬于鏈霉菌屬,定為Streptomyces sp.211726。對菌株211726的產(chǎn)物合成培養(yǎng)基進(jìn)行了初步優(yōu)化,并發(fā)酵獲得約100 L發(fā)酵液。然后通過固液分離、樹脂吸附、正向和反相色譜、半制備高效液相和分子篩層析技術(shù),分離獲得了19個(gè)化合物。利用各化合物的理

3、化性質(zhì)和波譜學(xué)特征(UV、IR、NMR和MS等),對化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了解析,分別鑒定為:15-甲基棕櫚酸2-甘油酯(S1),棕櫚酸2-甘油酯(S2),12-甲基肉豆蔻酸2-甘油酯(S3),脫丙二酸單酰基阿扎霉素F5a23-纈氨酸酯(S4),阿扎霉素F5a6-羧基-2-異丙基苯乙酯(S5),阿扎霉素F5b(S6),脫丙二酸單?；⒃顾谾3a23-(6-甲基)庚酸酯(S7),阿扎霉素F4a2-乙基戊酯(S8),脫丙二酸單?；⒃顾谾4a

4、23-(6-甲基)庚酸酯(S9),脫丙二酸單酰基阿扎霉素F4a23-(9-甲基)葵酸酯(S10),脫丙二酸單?；⒃顾谾4a23-(10-甲基)十一酸酯(S11),脫丙二酸單?；⒃顾谾5a23-(6-甲基)庚酸酯(S12),阿扎霉素F3a(S13),阿扎霉素F5a2-乙基戊酯(S14),阿扎霉素F4a(S15),阿扎霉素F5a(S16),諾卡胺素(S17),Ferrioxamine E(S18)和2S,3S-bis[(2-amin

5、o-7-oxo-7,8-dihydro-6H-1,3,6,8-dioxadiazecin-2-y1)methyl]succinic acid(S19,利托爾霉素)。其中S1、S4～S12、S14、S19等12個(gè)化合物為新化合物,化合物S19為新結(jié)構(gòu),其余7個(gè)化合物為已知化合物。
　　 抗菌活性研究表明:13個(gè)大環(huán)內(nèi)酯化合物均具有顯著的抗真菌和抗細(xì)菌活性。值得注意的是,化合物S7、S9、S10、S11、S13、S15和S16具有顯

6、著的抗尖孢鐮刀菌的作用,顯示出以此為代表的該類大環(huán)內(nèi)酯化合物在香蕉枯萎病化學(xué)防治方面的良好開發(fā)前景。
　　 毒性實(shí)驗(yàn)研究表明:除阿扎霉素F5a外,其余12個(gè)化合物均對人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-116)表現(xiàn)出一定的細(xì)胞毒作用。13個(gè)大環(huán)內(nèi)酯分離前的混合物的動物急性毒性試驗(yàn)表明:其腹腔注射的LD50及可信限為(97.94±15.50)mg/kg(P=0.95)。
　　 化合物S1～S3、S17、S18經(jīng)測試表明無抗真菌和抗細(xì)菌活