紅樹(shù)植物內(nèi)表生放線菌的分離、活性篩選和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、天然產(chǎn)物是藥物的重要來(lái)源。放線菌(Actinomycetes)在產(chǎn)生抗生素方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，大約75％的抗生素都是由放線菌產(chǎn)生，從植物內(nèi)生放線菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物中，可以分離到許多結(jié)構(gòu)新穎，生物活性多樣的化合物。紅樹(shù)植物生長(zhǎng)于海岸潮間帶，其獨(dú)特的生存環(huán)境賦予它豐富的微生物資源，是當(dāng)前倍受重視的藥用新資源。 本論文對(duì)采集自福建省漳州市浮宮鎮(zhèn)九龍江口、福建省廈門市集美和海滄三個(gè)地點(diǎn)的兩種紅樹(shù)植物(秋茄和桐花樹(shù))的葉部和根部進(jìn)行內(nèi)表生放

2、線菌的分離，共得到55株放線菌。 以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Eschenchia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、白色假絲酵母(Candida albicans)和黑曲霉(Aspergillus niger)為指示菌，采用雙層瓊脂擴(kuò)散法對(duì)這些菌株進(jìn)行抗菌活性檢測(cè)，共篩選得到活性菌株26株，占總菌株數(shù)的4

3、7.3％，其中主要是抗革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的活性；采用MTT法對(duì)其體外抗腫瘤活性進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)5株放線菌對(duì)Hela(人子宮癌細(xì)胞)和HepG2(人肝癌細(xì)胞)具有相對(duì)較高抑制作用，占總菌株數(shù)的9.1％。 通過(guò)16S rDNA的序列分析，對(duì)所分離菌株進(jìn)行了分子鑒定，結(jié)果表明只有一株放線菌屬于擬諾卡氏菌屬(Nocardiopsis)，其他均為鏈霉菌屬(streptomyces)。通過(guò)對(duì)分離菌株進(jìn)行AHBA引物篩選，有6株放線菌篩選結(jié)果為陽(yáng)性

4、，表明這6株菌的DNA中可能含有AHBA(3-氨基-5-羥基苯甲酸)合成酶基因，其中包括擬諾卡氏菌。 本論文對(duì)該株擬諾卡氏菌(3號(hào)菌)和另一株具有較高抗菌和抗腫瘤活性的鏈霉菌(18號(hào)菌)的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行了初步的研究。從3號(hào)菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了13個(gè)化合物，其中3個(gè)為新化合物(3C、3Y-10)，屬于吡喃酮類化合物；10個(gè)為已知結(jié)構(gòu)的化合物(3A、3Y-5、3Y-7、3Y-14、3L-A、3L-M、3L-G、3Y-1

5、8、3Y-19、3Y-20)：3A、3Y-5、3Y-7和3Y-14為色氨酸的衍生物；3L-A為鄰氨基苯甲酸甘油酯；3L-M為水楊酰胺類化合物；3L-G為乙酸甘油酯；3Y-18為乙酰酪胺；3Y-19和3Y-20為環(huán)二肽。從18號(hào)菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了4個(gè)已知結(jié)構(gòu)的化合物(18-C、18-F、18-E、18-G)，分別為對(duì)羥基苯乙酸甲酯、α-酮戊二酸二甲酯、2，6-二脫氧吡喃糖苷、2，6-二脫氧吡喃糖。對(duì)分離到的新化合物3C的抗菌