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文檔簡介
1、在西寧不同地區(qū)采集健康的番茄植株,用稀釋分離法共分離出24株菌株,通過回接驗證試驗得出,菌株TG-1等20株菌株為內(nèi)生菌。番茄的根、莖、葉和種子中都存在著內(nèi)生菌。用金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),大腸桿菌(Escherichia coli)作為指示菌,將分離到的內(nèi)生菌進行抑菌能力的測定,篩選出了三株具有較強拮抗作用的菌株,TG-1,TG-2,S-2。通過觀察內(nèi)生菌在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的特征和生理生化特性,
2、初步鑒定出菌株TG-1為堅強芽孢桿菌,菌株TG-2為枯草芽孢桿菌,菌株S-2為多粘芽孢桿菌。
通過單因素試驗,測定了三株菌株的生長曲線以及所需要的最佳溫度、pH值、轉(zhuǎn)速、裝液量、接種量,得出三株菌株的生長曲線大致相同,0~12h,處于生長的延滯期;在12~22 h,是對數(shù)生長期;在22~48h,處于生長的穩(wěn)定期;從48h開始,開始進入生長的衰亡期。當滅菌后的pH值為6.7時,菌株TG-1和菌株S-2生長最好,當滅菌后的pH
3、值為7.3時,菌株TG-2生長最好;菌株TG-1和S-2的最適生長溫度為28℃,菌株TG-2的最適生長溫度為30℃,三株菌株的最佳接種量為1%,最佳轉(zhuǎn)速為150r/min;菌株TG-1和S-2的裝液量為50ml/200ml時,生長量最大,菌株TG-2的裝液量為50ml/250ml時,生長量最大。通過單因素試驗和正交設計對三菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化,得出菌株TG-1優(yōu)化培養(yǎng)基配方為:玉米粉20g,麩皮1.5g,磷酸氫二鉀0.6g,酵母膏1
4、.5g,水1000ml。菌株TG-2優(yōu)化培養(yǎng)基配方為:玉米粉20g,蛋白胨2g,磷酸氫二鉀0.2g,硫酸鎂0.2g,酵母膏1.5g,水1000ml。菌株S-2優(yōu)化培養(yǎng)基配方為:紅糖20g,牛肉膏1.5g,磷酸氫二鉀+硫酸鎂(1:1)0.6g,酵母膏1.5g,水1000ml。
以抗利福平和硫酸鏈霉素雙抗性為標記,用不同的接種方法測定菌株TG-1和TG-2在不同品種的番茄中的定殖動態(tài),除了噴霧法之外其余的接種方法均可以回收到標
5、記菌,并且灌根法和浸種法接種效果較好。用灌根法接種TG-1R菌株和TG-2R菌株至不同品種的番茄植株和辣椒、白菜等植株后,發(fā)現(xiàn)能在番茄體內(nèi)和其他作物中較好的定殖并傳導,其消長規(guī)律為先增加后降低。這表明這兩株菌株對番茄品種沒有選擇性,且有廣泛的寄主植物。
用菌株TG-1和TG-2的發(fā)酵液原液、10倍稀釋液、100倍稀釋液、1000倍稀釋液浸泡番茄種子和處理幼苗后,發(fā)酵液原液對兩個品種的番茄的萌發(fā)、干重、根莖長、出苗率、鮮重均
6、有明顯的抑制作用,而稀釋液對其有不同程度的促進作用。用發(fā)酵液稀釋液、上清液、菌體分別浸泡番茄種子后,對番茄幼苗均有一定的促生作用。對于菌株TG-1,菌體的促生效果最好,而對于菌株TG-2,上清液(胞外分泌物)的促生作用最強。灌根法、浸種法、注射法三種接種方式對番茄的株高、鮮重及干重都表現(xiàn)出一定的促進作用:均可以提高番茄的單果重和單株產(chǎn)量;可以提高番茄中糖的含量、番茄紅素的含量、酸度比,明顯改善番茄的品質(zhì)。對白菜、辣椒和小麥三種作物的生長
7、較對照均有一定的促進作用,說明該菌可以廣泛的應用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。促生機制研究表明:菌株TG-1和TG-2能夠進入植物體內(nèi)定殖并傳導,該菌在植物體內(nèi)定殖量的多少與其促生作用呈正相關;起促生作用的并不單單是菌體或其外分泌物,而是這兩者共同起作用的結果:并且可通過提高植物體內(nèi)葉綠素的含量,提高植物葉片的光合速率、蒸騰速率等,從而促進植物的光合作用而達到促進其生長;能降低植株體內(nèi)丙二醛的含量,從而保護細胞膜促進植物生長,促進根的生長。以上多種因素
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