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文檔簡介
1、耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus,MRS)是一種醫(yī)院感染的重要病原菌,由于其嚴(yán)重耐藥的特性,給人類健康造成了嚴(yán)重威脅,而且近年來MRS在動物群中的檢出率也越來越高。PBP2a蛋白作為MRS的特有的表面標(biāo)志,廣泛存在于MRS表面。本研究克隆了MRS PBP2a蛋白轉(zhuǎn)肽酶區(qū)基因,并獲得了其原核表達(dá)蛋白,在此基礎(chǔ)上,建立了針對PBP2a蛋白的耐甲氧西林葡萄球菌的微量凝集試驗(yàn)檢測方法,
2、同時(shí)對臨床分離的75株葡萄球菌進(jìn)行檢測。
利用PCR方法由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌基因組中擴(kuò)增了PBP2a蛋白的轉(zhuǎn)肽酶區(qū)基因,構(gòu)建原核重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-6p-1-TPase,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL-21,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS-PAGE分析表明,得到的含有GST標(biāo)簽的融合蛋白大小約66KD,Westernblot鑒定表明,融合蛋白GST·TPase具有免疫原性。
以融合蛋白GST·TPase為抗原免疫家兔,
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