玉米轉基因受體幼胚培養(yǎng)體系的建立與優(yōu)化.pdf

1、以玉米育種上常用的昌7—2、鄭58、浚9058、87—1、478、齊319-紅、9801、濟533、丹598、吉853共10個優(yōu)良玉米自交系為材料,進行幼胚離體培養(yǎng)研究,通過愈傷組織的誘導、繼代、分化和植株再生試驗,調查其胚性愈傷組織誘導率、胚性愈傷組織克隆力、綠苗分化率等性狀,對影響玉米幼胚胚愈率和克隆力的因素進行了相關分析,確定了玉米幼胚培養(yǎng)各階段的廣適培養(yǎng)基,篩選出了幼胚培養(yǎng)能力較強的玉米自交系及其相適應的最適培養(yǎng)基,進一步證明了

2、幼胚接種時的最佳長度,從而建立了玉米轉基因受體幼胚培養(yǎng)體系。主要結果如下:
　　 1、通過N61、Ne2、N63、MS1、MS2、MS3、MB1、MB2、MB3九種誘導、繼代培養(yǎng)基和F1、F2、F3、F4四種分化培養(yǎng)基對10個玉米自交系幼胚愈傷組織誘導、繼代及分化影響的研究,認為Ne2、MB2和F2分別是誘導、繼代和分化階段的廣適培養(yǎng)基。
　　 2、利用正交設計系統(tǒng)分析了2,4-D、L—pro和CH三種成分對愈傷組織克隆

3、力的影響,確定了三者的最佳配比組合為2,4-D(2.0mg/L)、L—pro(700 mg/L)和CH(500 mg/L),還提出了玉米幼胚愈傷組織繼代階段的優(yōu)化配比。
　　 3、通過對10個玉米自交系昌7—2、鄭58、浚9058、87—1、478、齊319-紅、9801、濟533、丹598、吉853各階段的誘導和培養(yǎng),以平均愈傷組織誘導率、胚性愈傷組織誘導率、愈傷組織克隆力和綠苗分化率為評價標準,篩選出了幼胚培養(yǎng)能力較強的齊3

4、19-紅、87-l和9801三種基因型材料及其相配套的各階段最適培養(yǎng)基。
　　 4、從愈傷組織誘導率、胚性愈傷組織誘導率及愈傷組織生長質量等方面的綜合表現(xiàn)比較,得出較為合適的幼胚接種長度是1.5～2.5mm,該長度下的幼胚愈傷組織誘導能力強,生長快,質地松脆,色澤鮮艷,胚性率高,有利于植株再生。
　　 5、在玉米幼胚培養(yǎng)的誘導、繼代和分化的每個階段,基因型之間的顯著差異普遍存在,且在分化階段更為明顯。與之相比,培養(yǎng)基成分