幾種名貴洋蘭轉基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉化.pdf

1、　　研究了蝴蝶蘭、大花蕙蘭和文心蘭轉基因受體系統(tǒng)的建立和抗病基因轉化，結果表明：　　(1)由蝴蝶蘭種子播種可獲得大量無菌材料，在Hyponex培養(yǎng)基上，蔗糖濃度為25g/L時，種子萌發(fā)情況最好；也可從花梗節(jié)芽誘導營養(yǎng)芽從而建立快繁無菌體系，營養(yǎng)芽增殖的最佳激素組合為6-BA7.5mg/L+NAA1.0mg/L；在6-BA10.0mg/L+NAA1.0mg/L的激素組合下，從無菌苗的葉片誘導類原球體的誘導率最高可達87.0﹪，1/2MS

2、和Hyponex基本培養(yǎng)基對類原球體的增殖和分化效果較好；蔗糖濃度對類原球莖分化成苗的影響可用二次曲線擬合，在濃度為20g/L時，分化率達最高。　　(2)基因型對大花蕙蘭叢生芽增殖有顯著影響，差異的顯著性在不同基因型間達不同水平，離散性和集中性具有分組特性；影響大花蕙蘭叢生芽增殖系數差異的主要因子是細胞分裂素的濃度水平，二者關系可用二次式模型擬合；激素對愈傷組織的誘導和體胚發(fā)生的影響達極顯著差異，2，4-D濃度升高，愈傷組織誘導率增加

3、，但高于2.0mg/L時，外植體褐化死亡，KT是體胚發(fā)生的關鍵因子，其作用受到2，4-D的抑制和低濃度NAA的促進；石蠟切片觀察表明，大花蕙蘭體胚發(fā)生經過球形胚、魚雷胚，最后發(fā)育成子葉胚，形成具有完整植株特性的原球莖?！　?3)以文心蘭花梗為材料，在6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的1/2MS培養(yǎng)基上，花梗營養(yǎng)芽的誘導率可達60﹪；花梗營養(yǎng)芽的莖段，在6-BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L的培養(yǎng)基上，愈傷組織誘導率最