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文檔簡介
1、柚(Citrusgrandis(L.)Osbeck)是柑橘屬真正柑橘類植物,是我國的特色果樹。由于具有生長周期長和遺傳背景較復雜等特點,致使柚的精確物理圖譜一直難以構建,這對其在基因組學、分子生物學等方面的深入研究造成了困難。
本試驗采用單染色體微分離與微克隆技術,建立了48條柚單染色體文庫;通過構建AFLP指紋圖譜,利用Ntsys軟件進行分析,完成對柚單染色體較為系統(tǒng)的分類。
主要試驗結果如下:1、摸索出適
2、合柚的基因組DNA提取方法,獲得質量好、純度高的柚基因組DNA;采用玻璃針微分離法,分離得到48條單染色體。2、經(jīng)兩輪LA-PCR對柚單染色體進行體外擴增,建立了48條柚單染色體文庫;從23對引物組合中篩選出較為理想的3對,進行單染色體的AFLP選擇性擴增。
3、采用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)及銀染方法,獲得具有大量多態(tài)性片段的單染色體AFLP指紋圖譜。
4、通過Ntsys軟件分析AFLP指紋圖譜,將
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