橡膠樹種質(zhì)材料AFLP指紋圖譜的構(gòu)建.pdf

1、巴西橡膠樹(Hevea brasiliensis Muell-Arg)屬大戟科(Euphobiaceae)三葉橡膠樹屬(Hevea),高大喬木,典型的熱帶樹種,所產(chǎn)天然橡膠是重要的戰(zhàn)略物資,在國民經(jīng)濟(jì)中具有不可替代的作用。培育橡膠樹優(yōu)良品種是提高單位面積橡膠產(chǎn)量和促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ),長期以來的近緣雜交育種,造成橡膠樹遺傳基礎(chǔ)日趨狹窄,新品種增產(chǎn)幅度不大。因此,目前的橡膠樹育種急需拓寬新品種的遺傳基礎(chǔ),提高育種效率,加快新品種的培育,而橡

2、膠樹種質(zhì)材料的分類、保存、遺傳分析是選育種的前提。
　　 AFLP(擴(kuò)增片斷長度多態(tài)性)多態(tài)性強(qiáng),譜帶非常豐富且清晰可辨,試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性、重復(fù)性好,是迄今為止最有效的分子標(biāo)記之一。近年來,AFLP技術(shù)越來越多的用于林木資源的研究。本試驗(yàn)通過構(gòu)建適合于巴西橡膠樹葉片較穩(wěn)定的AFLP銀染體系,確定試驗(yàn)中需要的最佳反應(yīng)條件,建立了188種巴西橡膠樹種質(zhì)的AFLP指紋圖譜,分析其遺傳多樣性,為巴西橡膠樹資源的分子評價(jià)和分子分類提供依據(jù),

3、為我國優(yōu)良的天然橡膠資源的利用提供了科學(xué)依據(jù),對橡膠種質(zhì)資源研究和指導(dǎo)橡膠雜交育種有一定應(yīng)用價(jià)值。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.從256對EcoRⅠ/MseⅠ引物組合中,篩選出25對譜帶較清晰、多態(tài)性較高的引物組合,對188份橡膠樹種質(zhì)進(jìn)行擴(kuò)增分析,共擴(kuò)增出1274條電泳譜帶,其中701條為多態(tài)性帶,多態(tài)性比率為55.02％。
　　 2.利用篩選出來的25對橡膠樹AFLP引物組合對188份橡膠樹種質(zhì)材料采

4、用UPGMA進(jìn)行聚類分析,在遺傳相似系數(shù)為0.584處可劃分為3大類群,在遺傳相似系數(shù)為0.74處,第三大類群可以細(xì)分為5個(gè)類群。5個(gè)類群在不同相似系數(shù)處再細(xì)分為若干個(gè)小組。進(jìn)行了初步聚類及親緣關(guān)系分析。
　　 3.供試的188份橡膠樹種質(zhì)材料的遺傳相似系數(shù)最大的為0.9570815,最小的為0.5164521。大部分在0.84～0.94之間,占94.6％。說明大多數(shù)供試材料的遺傳差異相對較小。
　　 4.構(gòu)建了188份

5、橡膠樹種質(zhì)的AFLP指紋圖譜,其中12份橡膠樹種質(zhì)具有獨(dú)特的特征帶,根據(jù)指紋圖譜可以區(qū)分開所有的供試橡膠樹種質(zhì)材料。
　　 5.對比聚類分析與系譜分析,兩者獲得的結(jié)果有一致性,印證了橡膠樹AFLP指紋圖譜的準(zhǔn)確性、可靠性和實(shí)用性。指紋圖譜可以對橡膠樹種質(zhì)的譜系進(jìn)行研究,以完善橡膠樹選育種數(shù)據(jù)庫。
　　 6.雖然AFLP有不足之處,即較高的費(fèi)用和操作技術(shù)難度,但AFLP具有穩(wěn)定性好、重復(fù)性強(qiáng)、分辨率高等優(yōu)點(diǎn),用于橡膠樹種質(zhì)