豬瘟疫苗經(jīng)粘膜途徑接種動物免疫效果分析.pdf

1、豬瘟病毒是通過粘膜一消化道和呼吸道途徑感染動物體，因此如果通過局部粘膜接種疫苗，則可利用抗原與粘膜受體結合的占位作用，有效阻斷野毒經(jīng)粘膜途徑感染，達到事半功倍的免疫預防效果。本研究以現(xiàn)有豬瘟疫苗為基礎，通過與粘膜佐劑配合，探討豬瘟疫苗經(jīng)粘膜途徑免疫接種的可行性。
　　 本研究通過重組菌株發(fā)酵，獲得了大腸桿菌熱敏性腸毒素突變體蛋白LTKG、LTRG。利用親和層析法純化重組蛋白，經(jīng)BCA方法定量，蛋白濃度分別為：750μg/ml和6

2、60μg/ml。
　　 豬瘟脾淋巴苗分別與LTKG、LTRG蛋白佐劑混合，采用滴鼻、灌胃/口服、肌注三種途徑免疫小鼠，間隔10-15天進行二免、三免。每次免疫后，采血，收集鼻洗液和糞便。經(jīng)間接ELISA檢測血清抗體IgG及局部粘膜抗體IgA。結果顯示，三免前滴鼻組和灌胃組之間IgG水平相當，無顯著差異（P>0.05），但都低于肌注組；三免后，LTRG滴鼻免疫組和灌胃免疫組小鼠血清抗體IgG高于其它組，且高于疫苗肌肉注射組，LTR

3、G滴鼻免疫組與疫苗滴鼻免疫組差異顯著（0.01　　 豬瘟脾淋巴苗分別與LTKG、LTRG蛋白佐劑混合，通過滴鼻、灌胃/口服、肌注三種途

4、徑免疫仔豬，間隔10-15天二免、三免。采血，收集鼻洗液和糞便。經(jīng)間接ELISA檢測血清抗體IgG及局部粘膜抗體IgA。整個免疫過程中，血清IgG一直保持較高的抗體水平。三免后14天，口服疫苗+LTKG的豬血清抗體IgG顯著高于疫苗經(jīng)肌注和滴鼻免疫的豬（0.01

5、P<0.05），其中滴鼻疫苗+LTKG組IgA水平最高，與疫苗滴鼻免疫組顯著差異（0.01　　 上述試驗結果表明，豬瘟脾淋巴苗分別與LTRG和LTKG粘膜佐劑經(jīng)粘膜免疫途徑共