油菜黑斑病病原學及防治技術(shù)研究.pdf

1、油菜是我國重要的油料作物，具有較高的經(jīng)濟價值。近幾年，在湖北省油菜產(chǎn)區(qū)荊門市、孝感市、黃岡市、武穴市和仙桃市發(fā)生了較為嚴重的油菜黑斑病，直接影響了當?shù)剞r(nóng)民的經(jīng)濟效益。本實驗通過形態(tài)學和分子生物學方法將湖北省油菜黑斑病病原菌鑒定為Alternariabrassicicola。在此基礎上，研究了不同地理來源的菌株致病力差異以及不同致病力菌株的生物學特性，篩選抗病品種并探討了該病的藥劑防治技術(shù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 從湖北省荊門市

2、、孝感市、黃岡市、武穴市和仙桃市油菜種植地采集油菜黑斑病典型的病樣標本，通過常規(guī)組織分離法得到A和B兩種鏈格孢屬真菌(Alternariasp.)，它們的分離頻率分別為7.35％和92.65％。用兩種類型菌株的菌絲塊和分生孢子液接種新鮮健康的油菜葉片和莢果。結(jié)果表明，A種類型菌株的菌絲塊和分生孢子液接種2d后，即出現(xiàn)黑色壞死斑點；B種類型的菌株不致病。發(fā)病組織上再次分離得到的病原菌與接種的病原菌形態(tài)一致，表明A種類型菌株是湖北省油菜黑斑

3、病病原菌。形態(tài)學觀察結(jié)果表明，病原菌在PDA培養(yǎng)基上菌落初為白色，3d后菌落變成黑色煤煙狀，質(zhì)地緊密。用濾紙+PCA培養(yǎng)基誘導產(chǎn)孢，培養(yǎng)5天的孢子鏈鏈長常超過10個分生孢子，在單根分生孢子梗上形成小樹狀分枝的分生孢子鏈。在PCA培養(yǎng)基上25℃黑暗條件下培養(yǎng)7天后，成熟分生孢子褐色，卵形，近橢圓形或倒棒狀，具有1～5個橫膈膜和0～2個縱、斜隔膜，分隔處明顯隘縮；孢身長22.06～62.05×13.79～20.63μm。喙一般不發(fā)達，多為單

4、細胞假喙，淡褐色。根據(jù)Simmons和張?zhí)煊蠲枋龅逆湼矜叻N的形態(tài)特征，將該病菌鑒定為Alternariabrassicicola。該病原菌的rDNA-ITS序列與A.brassicicola的同源性達到100％。根據(jù)形態(tài)學和rDNA-ITS序列分析結(jié)果，確定該病原菌為A.brassicicola。
　　 從湖北省油菜產(chǎn)區(qū)采集的油菜黑斑病病樣進行組織分離共得到23個致病性菌株。對來自不同地理來源的23個菌株進行致病性測定，發(fā)現(xiàn)23

5、個菌株存在致病性差異。仙桃市采集的菌株致病性最強，來自黃岡市采集的菌株致病性最弱。選擇XT-1、WX-1和HG-5三個致病性有差異的菌株的生物學特性研究結(jié)果表明：菌絲在5-35℃的條件下均可生長，25℃是最適宜的溫度。菌絲在pH4.0-11.0范圍內(nèi)的PDB中均可生長，最適pH值為pH6.0-7.0。在Czapek液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，病菌可以利用多種碳源和氮源，在無碳或無氮條件下均可生長；葡萄糖和蛋白胨是該病菌最適的碳源和氮源。菌絲體和分

6、生孢子的致死溫度分別為55℃，10min和60℃，10min。
　　 在油菜品種進行抗病性評價中，離體葉片接種結(jié)果表明：用致病力強的XT-1菌株的分生孢子液接種，8份表現(xiàn)為抗病，32份表現(xiàn)為中抗，28份表現(xiàn)為感??；用致病力中等的WX-1菌株的分生孢子液接種，23份表現(xiàn)為抗病，36份表現(xiàn)為中抗，9份表現(xiàn)為感??；用致病力弱的HG-5的分生孢子液接種，53份表現(xiàn)為抗病，15份表現(xiàn)為中抗。大田莢果接種結(jié)果表明：用致病力強的XT-1菌株的

7、分生孢子液接種，7份表現(xiàn)為抗病，35份表現(xiàn)為中抗，26份表現(xiàn)為感病；用致病力中等的WX-1菌株的分生孢子液接種29份表現(xiàn)為抗病，32份表現(xiàn)為中抗，7份表現(xiàn)為感?。挥弥虏×θ醯腍G-5的分生孢子液接種，57份表現(xiàn)為抗病，11份表現(xiàn)為中抗。68份油菜材料中沒有發(fā)現(xiàn)對油菜黑斑病免疫和高抗的品種。
　　 室內(nèi)藥劑篩選試驗結(jié)果表明，苯甲丙環(huán)唑等11種供試藥劑在設置的不同濃度下對菌株XT-1的菌絲生長均表現(xiàn)一定的抑制作用，其中30％苯甲丙環(huán)

8、唑和10％的苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果最好，EC50分別為0.10813μg/ml,0.64863μg/ml,其次是16％松脂酸銅、30％惡霉靈水劑和5％井岡霉素A可溶性粉劑，最差的是75％百菌清可濕性粉劑，EC50為268.46050μg/ml。2009年盆栽藥劑防病試驗結(jié)果表明：30％苯甲丙環(huán)唑和10％的苯醚甲環(huán)唑的防病效果最好，對葉片黑斑病的防效分別為73.08％和69.23％,5％井岡霉素A可溶性粉劑的防病效果最差，防效為38.46％