溫室種植甘藍型油菜小孢子培養(yǎng)技術(shù)研究.pdf

1、單倍體育種作為一種高效育種方法，在油菜育種中已越來越受到關(guān)注。在油菜單倍體產(chǎn)生的各種途徑中，花粉培養(yǎng)(也稱小孢子培養(yǎng))是目前獲取單倍體最有效、最廣泛應用的方法。但是，目前我國(半)冬性油菜小孢子培養(yǎng)的低胚狀體誘導頻率、低染色體加倍率限制了該技術(shù)在我國油菜遺傳育種和基礎研究中的進一步應用。 為了建立油菜小孢子培養(yǎng)的高效技術(shù)體系，對溫室生長甘藍型油菜小孢子培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化試驗、研究了栽培條件對小孢子培養(yǎng)的影響、考查了低溫處理小孢子

2、培養(yǎng)物對油菜小孢子植株染色體加倍的效果。試驗得到以下結(jié)果： 1、溫室生長的油菜在進行小孢子培養(yǎng)時，不同的培養(yǎng)條件對產(chǎn)胚率和有效胚率都有明顯的影響，取材部位從主枝、一次分枝和二次分枝取材進行小孢子培養(yǎng)均可獲得胚狀體，但產(chǎn)胚率和有效胚率以主枝和一次分枝較高；花粉密度在0.5～3.0蕾花粉/ml范圍內(nèi)都可誘導產(chǎn)生胚狀體，以1.0蕾花粉/ml時最高；熱激溫度以32℃熱激3天的產(chǎn)胚率和有效胚率較高。 2、為拉長花期，可以采取分期在

3、溫室里播種的方式，9月、10月和11月播種均能得到有效胚。但是，隨著時間的延后，出胚率有所下降。 3、從溫室取材進行小孢子培養(yǎng)不容易污染，在一定時間內(nèi)重復取材培養(yǎng)成功率高，產(chǎn)胚率和有效胚率均比從大田取材的高得多。 4、不同的施肥水平對小孢子培養(yǎng)有明顯的影響。試驗結(jié)果，在溫室環(huán)境條件下，以硼砂0.34g做基肥一次施入，其它肥料按尿素0.27g、KCl0.27g和CaCl20.34g每周施一次肥，小孢子培養(yǎng)效果最好。