特早熟春性甘藍(lán)型油菜小孢子培養(yǎng)及DH系的遺傳多樣性研究.pdf

1、小孢子培養(yǎng)技術(shù)能夠大大縮短育種年限、提高育種效率、加速育種進(jìn)程。青海省氣候冷涼，能夠篩選出當(dāng)?shù)貧夂驐l件下高成胚特早熟基因型材料對(duì)于油菜遺傳育種意義重大。雜種優(yōu)勢作為自然界一種普遍的生物學(xué)現(xiàn)象，是提高作物產(chǎn)量的一種有效途徑。而遺傳多樣性研究是種質(zhì)資源評(píng)價(jià)和雜種優(yōu)勢利用的基礎(chǔ)，因此充分了解親本之間的遺傳差異，將親本材料劃分成不同的遺傳類群，有助于指導(dǎo)強(qiáng)優(yōu)勢雜交組合的選配，從而快速有效地利用雜種優(yōu)勢。長期以來，人們探討了雜種優(yōu)勢預(yù)測的多種方法

2、，但均表現(xiàn)一定的局限性，預(yù)測效果均不理想。近年來分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，為深入研究作物雜種優(yōu)勢提供了嶄新的方法和手段。
　　 本研究內(nèi)容之一為：以19份特早熟春性甘藍(lán)型油菜進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，考察影響小孢子培養(yǎng)的因素。本研究內(nèi)容之二為：用SSR標(biāo)記研究62個(gè)DH系的遺傳多樣性，從分子水平揭示其遺傳差異；田間試驗(yàn)研究重點(diǎn)考察31個(gè)DH系和其親本主要經(jīng)濟(jì)性狀包括株高、單株角果數(shù)、每果粒數(shù)、千粒重、單株產(chǎn)量、小區(qū)產(chǎn)量和含油量，用數(shù)量遺傳

3、學(xué)的方法研究其主要研究遺傳多樣性。本研究結(jié)果如下：
　　 (1)不同材料出胚率：19份材料(基因型)中有16份均可出胚，不同材料間出胚率差異很大，平均每蕾產(chǎn)胚量在0～10.51個(gè)之間，其中，780(R)×107-2和小帳120產(chǎn)胚率最高,分別達(dá)到10.51和4.43個(gè)/蕾。
　　 (2)不同取材部位(主枝與分枝)產(chǎn)胚率的差異：分枝的每蕾產(chǎn)胚數(shù)大部分都高于其主枝。
　　 (3)低溫處理對(duì)成苗率的影響：同一材料小孢子

4、胚分別4℃低溫處理0d，10d，20d。其中低溫處理10d成苗率最高，分別達(dá)到53.7％和44.6％，比對(duì)照分別高出32.5％和19％。同一材料2℃低溫處理10d成苗率高于4℃低溫處理10d的成苗率。
　　 (4)利用30對(duì)SSR引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，1～31DH系和32～62DH系分別擴(kuò)增出82、80個(gè)多態(tài)性片段，其中多態(tài)性位點(diǎn)分別占總擴(kuò)增位點(diǎn)的75.2％和74.1％，片段大小介于120～900bp之間。每對(duì)引物在不同品系間的等

5、位基因數(shù)在2～9之間,平均位點(diǎn)為3.63個(gè)。1～31DH系PIC(位點(diǎn)多態(tài)性信息含量)變幅為0.06～0.85,平均為0.60；32-62 DH系PIC變幅為0.06～0.86平均為0.56。聚類分析說明：通過小孢子培養(yǎng)獲得的DH系具有豐富的遺傳多樣性，并且來自不同組合的DH系的遺傳差異大于同一組合的DH系的遺傳差異。
　　 (5)SSR標(biāo)記1～31DH系之間的遺傳距離主要集中在0.2～0.4和0.4～0.6兩個(gè)范圍內(nèi)，占總數(shù)的

6、63.6％，而0.4～0.6范圍內(nèi)的最多，占全部材料的34.8％。32～62DH系之間的遺傳距離主要集中在0～0.2和0.4～0.6兩個(gè)范圍內(nèi)，占總數(shù)的61.7％，而0.4～0.6范圍內(nèi)的最多，占全部材料的35.5％。
　　 (6)DH系主要農(nóng)藝性狀的遺傳多樣性分析：在歐式遺傳距離為2.6時(shí)，可以分為九個(gè)類群；歐式遺傳距離數(shù)值主要集中在2.623～4.623，0.623～2.623和4.623～6.623三個(gè)區(qū)間，表明大部分種質(zhì)

7、材料間的遺傳基礎(chǔ)較寬，遺傳多樣性比較豐富,但與SSR分子標(biāo)記得到的結(jié)果不完全一致。
　　 (7)親本144/北山繁所得的31個(gè)DH品系的千粒重、單株產(chǎn)量和含油量的變異系數(shù)分別為9.18％、15.07％和4.58％，說明有相當(dāng)大的機(jī)會(huì)獲得高千粒重、單株產(chǎn)量和含油量材料。
　　 (8)2795-8((⊕))品系與其親本144的含油量差異達(dá)到顯著水平，這說明，可以通過小孢子培養(yǎng)技術(shù)選育出高組合含油量的品系。
　　 (9

8、)DH群體中，2793-4(⊕)、2786-2(⊕)、2782-6(⊕)、2804-4(⊕)、2767-7(⊕)、2800-4(⊕)、2789-6(⊕)和2798-4(⊕)品系的千粒重為前八名，與其親本144的差異達(dá)到顯著水平，與另一親本北山繁的差異達(dá)到極顯著水平。這說明，可以通過小孢子培養(yǎng)技術(shù)選育出高千粒重的品系。
　　 (10)DH群體中，2793-4(⊕)品系的單株產(chǎn)量最高，與其親本144的差異不顯著，與另一親本北山繁的差