殼聚(寡)糖和硅酸鈉的抑菌特性及抑菌機(jī)理的初步研究.pdf

1、對(duì)于果蔬病害的防治,目前化學(xué)農(nóng)藥控制是主要方法,但隨著大眾環(huán)保和健康意識(shí)的增強(qiáng),綠色農(nóng)藥的研發(fā)已經(jīng)成為當(dāng)前國(guó)際農(nóng)藥的發(fā)展潮流,因此具有生物安全性的天然殺菌劑的研發(fā)成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。殼聚糖(Chitosan)是甲殼素經(jīng)脫乙酰反應(yīng)后的產(chǎn)物,殼寡糖(Oligochitosan)是水溶性較好的低(寡)聚氨基糖,二者具有良好的生物相容性、生物安全性、廣譜抑菌性,是一類具有良好應(yīng)用前景的新型生物農(nóng)藥,但其抑菌機(jī)理方面,目前仍缺乏系統(tǒng)性的研究工作

2、。硅也作為新型殺菌劑,具有抑菌性,但其抑菌機(jī)理的研究也處于起步階段。
　　 為了更全面的研究殼聚(寡)糖及硅酸鈉對(duì)病原真菌的抑菌規(guī)律和抑菌機(jī)理。本論文主要在以下幾個(gè)方面展開研究工作:
　　 (1)研究硅酸鈉對(duì)黑腐菌(Alternaria citri)和灰霉菌(Botrytis cinerea)兩種病原真菌的抑菌規(guī)律及相應(yīng)果實(shí)病害防治的影響,探討硅酸鈉起抑菌效果的是硅的作用還是硅酸鈉溶解后所引起的pH的變化。在體外試驗(yàn)中隨

3、pH升高,對(duì)灰霉菌絲生長(zhǎng)、孢子萌發(fā)和芽管長(zhǎng)度的抑制作用都是增強(qiáng)的,而對(duì)黑腐菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用則在中性環(huán)境時(shí)相對(duì)較強(qiáng),對(duì)孢子萌發(fā)和芽管長(zhǎng)度的影響則隨pH升離而增加。相同pH下,硅酸鈉的抑菌效果明顯的比對(duì)照組和納米硅的抑制作用強(qiáng)。研究果實(shí)病害防治發(fā)現(xiàn),中性環(huán)境時(shí)有利于灰霉菌發(fā)病:而黑腐菌侵染果實(shí)時(shí)形成堿性傷口,堿性越強(qiáng)越有利于發(fā)病。相同pH環(huán)境時(shí),硅酸鈉和納米硅對(duì)兩種病原菌有一定的抑制效果,硅酸鈉的防治效果明顯優(yōu)于納米硅。綜上結(jié)果表明,在

4、硅酸鈉抑菌過(guò)程中,硅起到的抑制作用較小,pH值在硅酸鈉抑菌作用中起到了關(guān)鍵性的作用。
　　 (2)研究殼聚(寡)糖對(duì)柑橘酸腐病菌(Geotrichum candidum)和黑腐病菌(A.citri)的抑制規(guī)律以及果實(shí)病害防治。殼聚糖和殼寡糖對(duì)真菌不同的生長(zhǎng)階段的抑制作用有一定的差異性,在孢子萌發(fā)階段柑橘酸腐病菌(G.candidum)對(duì)殼聚糖和殼寡糖較柑橘黑腐病菌(A.citri)敏感,在菌絲生長(zhǎng)階段柑橘黑腐病菌對(duì)殼聚糖和殼寡糖

5、更為敏感;殼聚糖對(duì)兩種病原真菌孢子萌發(fā)的抑制效應(yīng)優(yōu)于殼寡糖,而殼寡糖對(duì)兩種病原菌菌絲擴(kuò)展的抑制效應(yīng)優(yōu)于殼聚糖。殼聚糖和殼寡糖對(duì)柑橘果實(shí)兩種病害均有一定的控制作用,可有效降低果實(shí)的發(fā)病率且高濃度的防治效果明顯優(yōu)于低濃度;殼寡糖對(duì)兩種病害的控制效果優(yōu)于殼聚糖;同時(shí),殼聚糖和殼寡糖對(duì)由酸腐病菌引起的酸腐病害控制效果優(yōu)于黑腐病害。
　　 (3)研究殼聚(寡)糖對(duì)灰霉病原菌(B.cinerea)的抑制規(guī)律并初步開展了對(duì)灰霉病原菌抑菌機(jī)理的

6、探討。通過(guò)不同濃度的殼聚糖和殼寡糖對(duì)灰霉菌不同生長(zhǎng)時(shí)期的抑制情況,發(fā)現(xiàn)隨著濃度的增加抑菌性增強(qiáng),且殼聚糖的抑菌性優(yōu)于殼寡糖。抑菌機(jī)理方面,通過(guò)分子標(biāo)記殼聚糖以及分子標(biāo)記灰霉孢子細(xì)胞壁等方法初步開展了殼聚(寡)糖抑菌機(jī)理的研究。結(jié)果表明,異硫氰酸熒光素標(biāo)記的殼聚糖化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,在0.001％-0.01％的低濃度下激發(fā)熒光強(qiáng)度與濃度線性關(guān)系良好?；颐规咦颖诘某晒?biāo)記和原生質(zhì)體的制備為進(jìn)一步研究殼聚(寡)糖作用位點(diǎn)和方式奠定了基礎(chǔ);殼聚糖和殼