殼聚糖抑菌活性及機(jī)理研究.pdf

1、殼聚糖具有良好的廣譜抑菌活性，被廣泛應(yīng)用于抗菌材料、食品工業(yè)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。但到目前為止，殼聚糖的抑菌機(jī)理尚不清楚。本文系統(tǒng)的研究了不同分子量殼聚糖對(duì)細(xì)菌和真菌的抑菌機(jī)理。研究結(jié)論如下： 1.合成了一系列殼聚糖衍生物，運(yùn)用紅外、差熱-熱重、紫外吸收光譜等方法進(jìn)行了表征。體外抑菌法研究了殼聚糖及其衍生物的抑菌性能。結(jié)果表明，除席夫堿殼聚糖外，殼聚糖及衍生物對(duì)細(xì)菌都具有較好的抑制作用，殼聚糖衍生物抑菌活性均強(qiáng)于殼聚糖本身。 2

2、.為了研究不同分子量殼聚糖對(duì)被試菌的作用位點(diǎn)，用熒光素異硫氰酸酯(FITC)標(biāo)記后與埃希氏大腸桿菌(E.coli)作用。激光共聚焦熒光顯微鏡照片揭示殼聚糖分子量的不同而導(dǎo)致抑菌機(jī)理不同，從而對(duì)殼寡糖和殼聚糖的抑菌機(jī)理提出了新的觀點(diǎn)。 3.運(yùn)用紫外吸收光譜、熒光光譜、拉曼光譜、瓊脂糖凝膠電泳和電化學(xué)的方法，研究了殼寡糖與質(zhì)粒DNA的相互作用。結(jié)果證明殼寡糖與DNA之間存在強(qiáng)而穩(wěn)定的作用，最終導(dǎo)致DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)破壞，形成了非電活性

3、化合物。這些結(jié)論在分子水平上探討殼寡糖與DNA相互作用機(jī)制方面都具有重要的意義。 4.以埃希氏大腸桿菌(E.coli)和金黃色葡萄球菌(St.aureus)為試驗(yàn)菌株，對(duì)殼聚糖作用后細(xì)胞膜完整性、內(nèi)膜與外膜滲透性、細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞膜蛋白結(jié)構(gòu)分析；運(yùn)用紅外、差熱-熱重和循環(huán)伏安法手段，研究了殼聚糖與模擬細(xì)胞膜間的相互作用。研究結(jié)果表明，殼聚糖增加了細(xì)胞外膜和內(nèi)膜的滲透性，殼聚糖中質(zhì)子化的-NH3+與細(xì)胞膜中的-P=O發(fā)生靜電作

4、用而破壞了細(xì)菌膜的結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)而使細(xì)胞膜的完整性破壞。同時(shí)，殼聚糖還影響了細(xì)胞膜蛋白的結(jié)構(gòu)。 5.殼聚糖對(duì)真菌黑曲霉的抑制作用與其分子量和濃度有關(guān)。隨著殼聚糖分子量的逐漸增大，對(duì)黑曲霉的抑制效果逐漸減弱；高分子量和高濃度的殼聚糖對(duì)黑曲霉不僅沒有抑制作用，反而會(huì)促使其生長(zhǎng)；只有在適當(dāng)?shù)蜐舛认碌囊欢ǚ肿恿繗ぞ厶菍?duì)黑曲霉才有抑制作用。研究發(fā)現(xiàn)，分子量為50 kDa濃度為0.1％(w/v)的殼聚糖對(duì)黑曲霉抑制效果最好，主要是通過抑制孢