西蘭花采后黑斑病的鑒定以及致病機(jī)理的研究.pdf

1、西蘭花(Brassica oleacea L.var.italica)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富而且具有公認(rèn)的抗癌功效。但是在采后階段,它會(huì)受到各種病原菌的侵染并且迅速衰老黃化,失去原有的商品性。對(duì)引起西蘭花采后病害的病原進(jìn)行分離鑒定,進(jìn)而深入研究其致病機(jī)理可為今后制定控制措施提供理論依據(jù)。本研究對(duì)引起西蘭花采后黑斑病的主要病原真菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)的鑒定,并對(duì)該菌促進(jìn)西蘭花衰老黃化的機(jī)理進(jìn)行了探討。
　　研究結(jié)果表明:
　　1.對(duì)

2、上市銷售的西蘭花的調(diào)查發(fā)現(xiàn),黑斑病是西蘭花銷售過程中最常見的采后病害之一,西蘭花的采后黑斑病往往與其花體的衰老相伴,感染黑斑病的花球會(huì)快速衰老黃化,失去商品性。
　　2.根據(jù)柯赫氏法則,對(duì)分離自西蘭花黑斑病的病原進(jìn)行致病性鑒定的結(jié)果表明,導(dǎo)致西蘭花采后病害的主要病原為鏈格孢屬真菌,其中菌株HLYB-4為引起花球黑斑病的主要病原菌,該菌的菌落呈青褐色,分生孢子青褐色、手雷狀呈鏈狀排列,大小約為24～51.5×7.5～23μm,2～6

3、個(gè)橫隔,0～3個(gè)縱隔,喙部不發(fā)達(dá),為單細(xì)胞假喙,形態(tài)學(xué)初步鑒定為蕓苔生鏈格孢菌(Alternaria brassicicola)應(yīng)用rDNA-ITS序列比對(duì)法和十字花科鏈格孢屬菌的特異標(biāo)記引物Abra1和Abra2擴(kuò)增鑒定進(jìn)一步將引起西蘭花采后黑斑病病原定名為A.brassicicola.
　　3.對(duì)西蘭花黑斑病病原A.brassicicola的適宜生長(zhǎng)溫度和pH的研究表明,該菌生長(zhǎng)的最適溫度為25℃,最適pH5～8。5℃低溫不能

4、完全阻止其菌絲生長(zhǎng)和孢子形成,而35℃可有效地抑制該菌在體外和植物體上的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢;A.brassicicola的分生孢子在pH2～12均可萌發(fā),在pH5～9三小時(shí)內(nèi)萌發(fā)率接近100％。此外,50ppm的外源乙烯能夠促進(jìn)其孢子萌發(fā)。
　　4.對(duì)接種A.brassicicola西蘭花的生理代謝指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明,接種第72小時(shí)的花球開始黃化,葉綠素迅速降解,乙烯釋放量和呼吸速率顯著升高,接菌組乙烯釋放高峰比對(duì)照組提早24小時(shí)形成。然而

5、,西蘭花采后Vc的迅速下降與病原菌侵染沒有顯著的對(duì)應(yīng)關(guān)系。5.對(duì)西蘭花衰老調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄水平的分析表明,接種A.brassicicola后西蘭花的ACC氧化酶基因BoACO2比對(duì)照組提前24小時(shí)上調(diào)表達(dá);ACC合成酶基因BoACS2也在接種后的72小時(shí)內(nèi)明顯上調(diào);葉綠素分解酶基因BoCLH1在前72小時(shí)的轉(zhuǎn)錄活性也明顯高于對(duì)照組,生理生化分析與分子證據(jù)證明A.brassicicola是誘導(dǎo)西蘭花采后的黃化衰老的重要因素之一。
　　上