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文檔簡(jiǎn)介
1、近年來(lái),赤霉素受體基因GID成為研究的熱點(diǎn),在許多植物中如擬南芥、水稻、楊樹、棉花,葡萄等有所研究,但在柑橘上的研究未見報(bào)道。為了研究赤霉素受體基因GID在柑橘上的作用,本論文以紐荷爾臍橙中赤霉素受體基因Cs GID1為研究對(duì)象,采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得轉(zhuǎn)CsGID1基因煙草植株,并利用石蠟切片技術(shù)、亞細(xì)胞定位技術(shù)、CIRAS-2光合儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)從植物細(xì)胞組織、光合生理特性、目的基因的表達(dá)量等方面對(duì)轉(zhuǎn)基因植株和對(duì)照植株進(jìn)行了分析
2、。主要研究結(jié)果如下:
1.CsGID1基因序列經(jīng)Blastn分析,發(fā)現(xiàn)它與葡萄(AFG17072.1)和擬南芥(XP_002874383.1)的GID1核酸序列相似性分別為81%和79%。用Blastx分析,紐荷爾臍橙中赤霉素受體基因GID1與陸地棉的GID1同源性最高。
2.本實(shí)驗(yàn)以轉(zhuǎn)基因煙草葉片主脈為材料,通過(guò)石蠟切片實(shí)驗(yàn),觀察比較轉(zhuǎn)基因植株和對(duì)照植株,結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因CsGID1煙草葉片主脈木質(zhì)部導(dǎo)管較
3、對(duì)照植株多,且排列緊密不整齊。通過(guò)將pBI121-CsGID1-GFP轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn),CsGID1與GFP的融合蛋白在細(xì)胞核中表達(dá)。
3.分別用GA3和多效唑處理轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株,結(jié)果表明GA3處理的轉(zhuǎn)基因植株最高,凈光合速率最大,然而葉綠素含量(1.55±0.09 mg/g)最少;多效唑處理的轉(zhuǎn)基因植株株高最矮,葉綠素含量(1.71±0.15mg/g)及凈光合速率較大。
4.利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)C
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