AsiaⅠ型口蹄疫基因治療與基因免疫雙功能疫苗載體的構(gòu)建.pdf

1、目前，對(duì)于口蹄疫的防制主要采用屠殺、隔離和免疫接種，其中疾病流行前的免疫接種是特異性保護(hù)家畜免遭感染的有效途徑，但現(xiàn)有疫苗接種動(dòng)物后都會(huì)存在免疫空白期，即誘導(dǎo)免疫動(dòng)物產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，等待有效抗體產(chǎn)生的一段時(shí)間。動(dòng)物如果在這段時(shí)間內(nèi)遭到病毒的入侵往往會(huì)引起該病的流行。為探索解決免疫動(dòng)物在疫苗接種的免疫空白期內(nèi)發(fā)病這一難題，本研究以AsiaⅠ江蘇株為模板，引入RNA干擾機(jī)制，進(jìn)行了雙功能疫苗的探索研究，并取得下述進(jìn)展： 1.

2、對(duì)pBudCE4.1載體進(jìn)行改造，將其CMV啟動(dòng)子替換為U6啟動(dòng)子，成功改造出適合于雙功能疫苗研究的雙啟動(dòng)子載體pBudCE4.1-U6。 2.利用綠色熒光蛋白的表達(dá)與沉默表達(dá)對(duì)載體pBudCE4.1-U6的雙啟動(dòng)子分別進(jìn)行功能效率鑒定，結(jié)果表明對(duì)載體的改造是成功的，載體pBudCE4.1-U6的兩個(gè)啟動(dòng)子均能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)。 3.針對(duì)AsiaⅠ江蘇株的3D基因設(shè)計(jì)3條小RNA干擾片段，并將之與免疫組合基因P12A+