靈芝漆酶及部分胞外酶研究.pdf_第1頁
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1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文靈芝漆酶及部分胞外酶研究姓名：劉健鵬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生藥學(xué)指導(dǎo)教師：蘭進(jìn)20090501Pekingunionmedicalcollege(：盤i絲雖￡星4￡鯉旦壘絲理2f絲壘型i￡旦』點(diǎn)坌!堡絲￡l望△墜￡旦魚!AbStHactGanodermalucidumisafamousfungiwithveryhighmedicinalvalueinChinaTheextracellularen

2、zymesinvolvedintheprocesstogetnutritionforGlucidumwhencultured，wererelatedtoitsoutputandqualityAsoneofextracellularenzymes，laccasefromGllucidumisalsoamultifunctionphenoloxidasewithwideapplicationInordertoelucidatetherela

3、tionbetweenextracellularenzymesandoutputandqualityofG1ucidumandpromotetheapplicationofG1ucidumlaccasewestudiedthevariationofextracellularenzymesandpolysaccharidesofG1ucidumS3culturedAfterscreeninginducersoflaccase，wealso

4、usedaprocedurewhichinvolvedammoniumsulfateprecipitation，DEAE—sepharoseanionexchangechromatographyandSource15PHEhydrophobicchromatographytopurifylaccaseandthencharacterizeditindetailItwasshowedthattheligninmodifyingenzyme

5、sofG1ucidumgrownwithcottonseedskinaSthesolecarbonandenergysourceconsistedoflaccaseandmanganesedependentperoxidase，noligninperoxidasewasobservedEveryenzymehadadifferentvariationtrendCulturemethodshadaneffectonthepolysacch

6、aridecontentThemaximummyceliumbiomassappearedonthe7thday，whilethemaximumactivityofthelaccaseenzymeappearedonthe9thdayThemajorityofthepotentialtestedwereabletoserveasinducersforlaccasetosomeextent，amongwhich26dimethylanil

7、ineWasfoundtobethebestwhentheconcentrationWas08mmol／LWiththenative—PAGEzymogram，itWasinferredthatG1ucidumsecretedonlyasinglelaccaseinliquidfermentation，notaffectedbyinducersThepurifiedlaccaseWasasinglesubmitproteinwitham

8、olecularweightof596KDabySDSPAGETheKmwas902x10～mol／LwithABTSassubstrate，while108x10。mol／LwithguaiacolassubstrateThislaccasewasstablefrompH60to80Thetemperatureoptimumforitsactivitywas45。CTheresearchalsoshowedthatalotofcomp

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