DNA甲基化在荷葉鐵線蕨性器官分化及體細(xì)胞胚胎發(fā)生中的作用.pdf

1、研究發(fā)現(xiàn)適量、適時(shí)的外源鈣處理可促進(jìn)荷葉鐵線蕨配子體雌性性器官的分化及頸卵器數(shù)量的增多，透射電鏡觀測(cè)結(jié)果顯示，經(jīng)外源鈣處理后的配子體胞內(nèi)鈣離子含量明顯高于未經(jīng)外源鈣處理的配子體，鈣離子主要分布于細(xì)胞膜邊緣，這表明外源鈣在配子體性器官形成和分化中起到了促進(jìn)和調(diào)節(jié)作用。研究中還發(fā)現(xiàn)，經(jīng)外源鈣處理的配子體的部分后代可以產(chǎn)生多孢子體，它們即可通過不同位置的葉緣細(xì)胞進(jìn)行無配子生殖形成單倍的孢子體，同時(shí)又可以在性器官形成區(qū)，通過有性生殖形成二倍的孢

2、子體，而其體細(xì)胞胚形成及發(fā)育都處于生殖隔離狀態(tài)。
　　 在基因水平上，運(yùn)用MSAP技術(shù)，探討DNA甲基化在荷葉鐵線蕨配子體性器官分化及無配子生殖的胚胎發(fā)育中的作用。MSAP分析結(jié)果顯示，荷葉鐵線蕨基因組中約有26-30％的CCGG位點(diǎn)發(fā)生了胞嘧啶甲基化。1）經(jīng)外源鈣處理的同源配子體所形成的無性器官分化、有性器官形成與經(jīng)外源鈣處理后可產(chǎn)生多頸卵器的配子體:配子體性器官形成前后及多性器官形成時(shí)，甲基化比例均呈上升的趨勢(shì)，在多性器官形

3、成時(shí)達(dá)到最高，甲基化率與性器官數(shù)量呈明顯線性相關(guān)，這與HPLC分析結(jié)果一致。產(chǎn)生多性器官的配子體其基因組超甲基化率與去甲基化率均明顯增高?；厥詹町悧l帶中與鈣離子信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)的WAK及WRKY轉(zhuǎn)錄因子同源性較高的較多。2）無配子生殖產(chǎn)生多孢子體的胚胎發(fā)育過程中，無胚組織時(shí)DNA總甲基為19.2％，胚性細(xì)胞團(tuán)時(shí)DNA總甲基化水平下調(diào)至17.9％，胚芽時(shí)DNA總甲基化水平上調(diào)至20.1％，芽點(diǎn)時(shí)又下調(diào)至19.5％。超甲基化率最高的階段是無胚組